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目的:帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种与年龄相关的神经退行性疾病,其受环境和遗传因素影响,发病率高、发病机制复杂、有非运动症状的发生。疼痛是PD患者常见的非运动症状之一,严重影响PD患者的生活质量,具体的发病机制尚不明确。本课题利用6-OHDA诱导的PD大鼠模型,探讨5-HT3受体在脊髓水平参与PD疼痛的发生的机制,以期为临床PD疼痛的治疗提供理论基础。材料与方法:以双侧黑质致密部(Substantia nigra pars compacta,SNpc)为定位点,利用脑立体定位仪微量注射6-OHDA诱导PD大鼠模型,三周后进行转棒和旷场实验,对假手术组(Sham组)和模型组(6-OHDA组)大鼠的运动能力进行测定,筛选造模成功的PD大鼠;利用western blot检测纹状体中酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)以及脊髓L4-L6段5-HT3A受体、5-HT1A受体的蛋白水平;利用免疫荧光技术检测中脑黑质中TH阳性神经元的表达;利用电子Von Fery测痛仪和辐射热甩尾仪对Sham组和6-OHDA组大鼠进行机械痛阈值和热痛阈值的测定;使用异氟烷麻醉大鼠,通过鞘内注射5-HT3受体拮抗剂Ondansetron或激动剂M-CPBG,分别在15 min、30 min、45 min、60 min、90 min、120 min进行痛阈测定;利用全细胞膜片钳的方法记录Sham组和PD模型组L4-L6脊髓背角中细胞电活动情况,分析动作电位频率、动作电位阈值、膜电阻等电生理相关指标的变化。结果:造模三周后,转棒结果显示6-OHDA组大鼠的在棒时间明显低于Sham组,表明6-OHDA组大鼠的运动能力受损;旷场结果显示6-OHDA组的总运动距离和平均速度相较于Sham组无明显差异,表明大鼠的自主运动能力无影响;免疫荧光的结果表明黑质致密部的多巴胺能神经元丢失,Western blot结果显示TH的蛋白表达降低50%-70%,表明造模成功;脊髓背角中5-HT3A、5-HT1A的蛋白表达量无明显差异。Von Frey和辐射热甩尾的结果显示6-OHDA大鼠的机械痛阈值和热痛阈值明显低于Sham组,表明6-OHDA大鼠存在痛敏现象;鞘内注射5-HT3受体拮抗剂Ondansetron(100 μg)可以有效缓解6-OHDA大鼠的痛敏现象,激动剂M-CPBG(100μg)对大鼠的痛敏行为无明显改变。电生理结果表明6-OHDA组相较于Sham组脊髓背角神经元细胞兴奋性明显增高、动作电位阈值显著降低、膜电阻、半幅宽无显著变化。5-HT3受体拮抗剂Ondansetron(10 μmol/L)灌流给药后6-OHDA组的脊髓背角神经元的兴奋性显著降低,动作电位的阈值升高、最大频率显著降低、半幅宽无显著变化,激动剂M-CPBG(10μmol/L)对6-OHDA组的脊髓背角神经元细胞的兴奋性无影响,提示5-HT3受体拮抗剂Ondansetron可以逆转6-OHDA大鼠脊髓背角神经元的异常兴奋,而激动剂却不能改变此作用。5-HT1受体拮抗剂WAY-100635(10 μmol/L)灌流给药后对6-OHDA大鼠的脊髓背角神经元的兴奋性无显著影响。结论:在脊髓背角中5-HT3受体而非5-HT1受体可能通过增强受体敏感性,导致细胞兴奋性增加的方式参与6-OHDA大鼠PD模型的痛敏反应。抑制脊髓背角5-HT3受体可以改善6-OHDA大鼠诱导的PD模型大鼠的痛敏反应。