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黄胸蓟马普遍分布于我国南方省份,对芒果和香蕉等水果及园艺花卉可造成较大损失。为解决黄胸蓟马的检验检疫和生物防治难题,本文对黄胸蓟马的SCAR分子标记和生防绿僵菌进行了初步研究,研究结果如下。1.本实验采用L9(34)正交设计法,对黄胸蓟马DNA的RAPD-PCR反应体系进行优化,确定最佳反应体系为:总体积为20μL,其中含有Primer 0.2μmmol/L,dNTP0.2mmol/L,Mg2+1.5mmol/L,Taq DNA polymerase 1U,DNA 模板 20ng。利用该反应体系对9个随机引物和8种蓟马进行SCAR分析,引物OPB-06扩增出了黄胸蓟马特异条带,获得其分子标记。2.用13株金龟子绿僵菌对黄胸蓟马成虫进行致病力筛选,获得了 5株具有高致病力的菌株,即Ma1、Ma2、Ma3、Ma6和Ma8。采用浸渍法以2×108孢子/mL孢子悬液处理黄胸蓟马成虫,这5个菌株对黄胸蓟马成虫的致死率,在9d内都达到100%,其中Ma1和Ma8在7 d内就达到100%。3.对5株高致病力金龟子绿僵菌的培养特性进行了测定,包括孢子活力、菌落生长速率和产孢量,以及蛋白酶、脂肪酶和几丁质酶的酶活。结果表明,5个菌株的孢子活力大小依次为Ma1>Ma3>Ma8>Ma2>Ma6,孢子活力为(97.83±0.11)%到(94.70±0.09)%,各菌株之间的差异不显著(P>0.05);Ma1的菌落生长速率较其他菌株大;产孢量最大和最小的菌株分别是Ma1和Ma6,5个菌株的产孢量为(1.67±0.47)×107孢子/mm2至(2.24±0.35)X107孢子/mm2,其产孢 r量差异不显著;蛋白酶酶活大小依次为Ma2>Ma6>Ma8>Ma1>Ma3,Ma3的蛋白酶酶活明显小于其余4个菌株的蛋白酶酶活;脂肪酶酶活大小依次为Ma1>Ma2>Ma3>Ma8>Ma6,各菌株的酶活差异较小;几丁质酶酶活大小依次为Ma6>Ma1>Ma3>Ma8>Ma2,Ma6 和 Ma1 与 Ma3、Ma8 和 Ma2 之间的酶活差异显著。4.通过扫描电子显微镜观察,明确了金龟子绿僵菌侵染黄胸蓟马成虫的基本过程:首先是绿僵菌分生孢子附着到昆虫各个部位的表面,环境条件适宜时萌发长出芽管,芽管继续生长,可以直接穿透寄主表皮,或者形成附着胞后再侵入表皮,然后开始大量繁殖,最终导致寄主死亡。黄胸蓟马成虫在接种8h后,绿僵菌开始萌发;16h可见芽管侵入昆虫表皮;48h昆虫表皮受到严重破坏,可见大量孢子体繁殖扩散;72h绿僵菌的菌丝体已经侵染昆虫体内各个器官,昆虫体表被大量的菌丝和孢子包围。借助立体显微镜观察,发现保湿培养的僵虫第1d有大量白色菌丝长出来,第2d绿色孢子开始形成,第6d绿色孢子包围了虫尸。