【摘 要】
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本研究采用生物素化的β—内啡肽偶连的AFM探针,在对阿片μ—受体高表达的μ—66细胞活体成像的基础上,测定μ—受体与其内源性的配体β—内啡肽之间的亲和力以及经吗啡反复
【出 处】
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中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院
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本研究采用生物素化的β—内啡肽偶连的AFM探针,在对阿片μ—受体高表达的μ—66细胞活体成像的基础上,测定μ—受体与其内源性的配体β—内啡肽之间的亲和力以及经吗啡反复刺激作用之后,两者亲和力的改变。旨在通过原子力显微技术(AFM)从实验力学方面研究阿片受体与其配体分子间的相互作用,为理解阿片类药物的致依赖机制提供受-配体间分子力学信息,同时也为AFM在受体药理学中的应用提供方法学基础。 (一) 原子力显微镜对生理溶液中活细胞成像技术的建立: 研究了原子力显微技术(AFM)在生理条件下对活细胞成像的基本方法,并对各种影响成像因素如针尖与细胞表面的非特异性相互作用、AFM悬臂弹性系数、细胞表面柔性等问题提供相应的解决方案。从而为AFM在成像的基础上对活细胞其它性质的研究提供基础。主要结果包括以下几个方面: (1) 针尖与细胞表面的非特异性相互作用对成像的影响: 近中性的磷酸盐缓冲液(PBS)等电解质溶液中可以避免样品表面所带电荷参与针尖与样品的接触,使静电力降至尽可能小限度。 (2) AFM悬臂弹性系数对成像的影响: 实验结果表明,弹性系数过大,会造成活体细胞的严重变形或脱离基底。弹
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