急性心肌梗死是引起猝死的常见原因，然而，在法医实践中，对于心肌梗死的超急性期(＜3小时)发生死亡的心脏用传统的肉眼观察或常规组织学检查的方法很难发现心肌的形态学改变从而提供客观的诊断依据。尽管目前有各种检测指标及各种检验方法被法医学界用于死后诊断或排除急性心肌梗死，但是，迄今没有任何一种方法或指标能很好地解决实际办案的死因诊断问题。 心脏型脂肪酸结合蛋白是一种小分子蛋白质(14～15kDa)，且有严格的器官特异性，大量地存在于心肌细胞浆中，其作用是上调心肌细胞中的长链脂肪酸。由于其有分子量小、心肌细胞中含量高且为水溶性的特点，当心肌细胞缺血时，心脏型脂肪酸结合蛋白很容易并迅速地透过细胞膜而漏出到细胞间质，从而进入血液循环。大量的研究证实心肌缺血12小时内，用血液中脂肪酸结合蛋白的浓度诊断心肌梗死在特异性和敏感性方面都优于肌红蛋白，究其原因主要是脂肪酸结合蛋白的分子量较肌红蛋白(18kDa)小且有心脏特异性。正因如此，脂肪酸结合蛋白最近被世界卫生组织列为新推荐的诊断急性心肌梗死的早期指标之一。 一、心脏型脂肪酸结合蛋白诊断心肌梗死的免疫组织化学研究 1、动物模型 通过结扎冠状动脉左前降支的方法建立急性心肌梗死的动物模型。54只健康Wistar大白鼠，重250～300克，雌雄不限，随机分为六个实验组和三个不同对照组，每组六只。10％水合氯醛注射麻醉后气管插管，用人工呼吸机辅助呼吸。切开皮肤和左第四肋间后，在冠状动脉左前降支根部结扎造成心肌缺血，血管供血区心肌变苍白或心电图ST段上抬≥0.1mv即为结扎成功。对照组大白鼠除不结扎冠状动脉外，其他步骤与实验组完全相同。各实验组大白鼠分别于结扎后15分钟、30分钟、1小时、2小时、4小时，8小时后处死，对照组大白鼠于手术后1小时处死，取出心脏放入10％PBS福尔马林中固定。24小时后，于梗死区中央取材，按常规方法脱水、包埋。 2、免疫组织化学染色检测缺血心肌细胞中的心脏型脂肪酸结合蛋白和肌红蛋白 脂肪酸结合蛋白和肌红蛋白的免疫组织化学染色均采用S-P法。正常对照组心肌胞浆全部染成均匀的棕黄色，用苏木素衬染后，细胞核染成淡蓝色，心肌细胞间质及其他细胞成分不着色。实验组心肌细胞在心肌梗死后不同时间段，其胞浆内的脂肪酸结合蛋白的脱失与其他学者描述的肌红蛋白脱失规律相似。缺血巧分钟组，在心内膜下心肌、乳头肌可见散在或小灶性的部分H一FABP缺失。缺血30分钟组，开始出现脂肪酸结合蛋白的完全脱失，但仍然局限于心肌内膜下和乳头肌。缺血1小时和2小时组的心肌则出现斑片状缺失且波及到心肌中层。到缺血4小时，心肌细胞则出现全层细胞的完全脱失并随着缺血时间的延长，脱失面积增大。 脂肪酸结合蛋白和肌红蛋白在心肌缺血不同时间的各组缺失面积经比较和统计学分析表明:实验组的脂肪酸结合蛋白与肌红蛋白缺失面积与其各相应对照组比较均有显著性差异，但脂肪酸结合蛋白与肌红蛋白这两个指标在缺血15分钟组、30分钟组、1小时组和2小时组之间没有明显的差异性，在缺血4h时后才’出现脂肪酸结合蛋白脱失比肌红蛋白脱失稍差。二、心脏型脂肪酸结合蛋白应用于人体材料的免疫组织化学研究 为了验证用免疫组织化学染色的方法检测脂肪酸结合蛋白的脱失在实际办案应用方面是否较检测肌红蛋白更敏感、特异，选择2个对照组和一个实验组的人体材料进行比较。其中(l)阳性对照组(心肌梗死组)7例，均为经肉眼观察或常规HE染色检查确诊为心肌梗死;(2)阴性对照组(非心肌梗死组)6例，均死于脑外伤且没有心肌异常者;(3)实验组(疑似心肌梗死组)从武汉大学医学院法医学教研室尸检档案中选取9例，选取的标准是:经过系统尸体解剖和毒物分析没有发现其他死因，经肉眼观察和HE染色，怀疑有心肌损伤并有下列条件之一者:(I)症状发作后6小时内死亡且临床诊断为急性心肌梗死或;(11)尸体解剖证实其冠状动脉有中度到重度狭窄，但肉眼观察和HE染色均未发现有心肌梗死的形态学改变或;(111)胸部外伤造成心肌挫伤或;(W)其他可能引起心肌损伤疾病。所有7例阳性对照组的相应的心肌细胞大部分均有脂肪酸结合蛋白和肌红蛋白的脱失并与正常心肌细胞分界清楚，其中夹杂有少量的部分脱失细胞和正常细胞。阴性对照组的心肌细胞除有少量细胞的肌红蛋白与脂肪酸结合蛋白染色浅淡外，绝大部分心肌细胞浆均为强阳性的棕黄色。实验组中，有3例心肌有明显的广泛的脂肪酸结合蛋白脱失，4例有局限性部分脱失，其他2例则只有少量脱失。在此9例当中，肌红蛋白的脱失情况与脂肪酸结合蛋白脱失的情况基本相同。说明脂肪酸结合蛋白是诊断心肌缺血敏感指标。三、心肌缺血后血液中脂肪酸结合蛋白含量的变化观察 在进行冠状动脉结扎之前，通过颈动脉插管提出血样备做大鼠正常状况下的脂肪酸结合蛋白浓度基线。在结扎冠状动脉之后的不同时间段也分别取血测量其浓度变化情况。所提取的血样经离心后留取血清放入零下20摄氏度环境中保存，选取抗鼠脂肪酸结合蛋白酶联免疫吸附试剂盒进行检测，该试剂盒检测的最低限为0