目的:CD40是肿瘤坏死因子受体（TNFR）蛋白家族的成员。CD40L是其受体,表达于活化的CD4+T细胞和血小板,CD40和CD40L相互作用在触发肝细胞凋亡中起主要作用,CD40L基因敲减的小鼠肝炎模型中,肿瘤坏死因子水平和肝细胞损伤明显减弱,肿瘤来源的自噬小体可以通过上调巨噬细胞上CD40L的表达,显著增强B细胞的活性。有报道称,急性酒精可以激活自噬;而在ALD小鼠模型中自噬通量受损。ASPP2（Apoptosis-stimulating of p53 protein 2）p53凋亡刺激蛋白2,是ASPP家族的成员,包括ASPP1、ASPP2和i ASPP。ASPP2在调节细胞凋亡、生长和分化方面起着重要作用。ASPP2在非酒精性肝病模型中,可以通过抑制自噬减轻肝损伤,降低甘油三酯水平。目前,酒精性肝病中ASPP2基因、肝细胞自噬和CD40L的关系尚不清楚。在这项研究中,我们通过假设ASPP2能够抑制酒精刺激下7702细胞中的自噬,建立ASPP2敲减和ASPP2过表达的7702细胞模型,探索酒精刺激下7702细胞中ASPP2通过抑制自噬上调CD40L的机制。方法:首先,我们使用了HL7702细胞人正常肝细胞作为细胞模型,使用慢病毒转染7702细胞,构建ASPP2敲减的细胞模型,使用腺病毒感染7702细胞,构建ASPP2过表达的细胞模型。在经过一定酒精浓度（400m M）处理不同时间后,通过Western Blot检测LC3、ASPP2、P62、PS6、RAS、m TOR、P70s6k和CD40L蛋白的表达。其次采用免疫荧光技术（IF）,观察检测7702细胞模型中CD40L的表达;在7702细胞模型中转染GFP-LC3质粒,酒精刺激后通过荧光显微镜观察自噬小体的分布和数量。最后,外源性地加入RAS抑制剂（5μM）、自噬激动剂（10μM）和自噬抑制剂（10μM）,酒精刺激后,使用Western Blot检测LC3、ASPP2、P62、PS6、RAS、m TOR、P70s6k和CD40L蛋白的表达;采用免疫荧光技术（IF）,检测对照组和干预组中CD40L的表达情况;在7702细胞模型中转染GFP-LC3质粒,荧光显微镜下观察对照组和干预组之间自噬小体的分布和数量。结果:（1）结果发现敲低ASPP2稳转的7702细胞中,无水乙醇400m M刺激0h、12h、24h、48h后,Western Blot结果显示ASPP2、P62、PS6、RAS、m TOR、P70s6k和CD40L的表达水平低于对照组,而LC3的表达水平高于对照组。相反,在过表达ASPP2的7702细胞中,ASPP2、P62、PS6、RAS、m TOR、P70s6k和CD40L的表达水平高于对照组,LC3的表达水平低于对照组。（2）在敲低ASPP2稳转的7702细胞中,免疫荧光方法观察到CD40L蛋白的免疫荧光强度明显低于对照组,在过表达ASPP2的7702细胞中结果相反。（3）RAS抑制剂（salirasibe）干预组P62、PS6、RAS、m TOR、P70s6k和CD40L蛋白的表达水平少于对照组,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ多于对照组;CD40L免疫荧光强度低于对照组,自噬小体多于对照组。自噬激动剂（RAPA）干预组P62、PS6、m TOR、P70s6k和CD40L蛋白的表达少于对照组,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ多于对照组;CD40L免疫荧光强度少于对照组,自噬小体多于对照组;自噬抑制剂（MHY）干预组与自噬激动剂（RAPA）干预组的结果相反。结论:在酒精刺激下,7702细胞中ASPP2通过RAS/m TOR通路抑制自噬,促进CD40L蛋白的表达。