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目的：动态观察猪血清免疫性大鼠肝纤维化模型的病理特点；探讨下瘀血汤调控 MMPs/TIMPs抗肝纤维化的作用机制。
方法：猪血清腹腔注射复制大鼠肝纤维化模型，0.5ml/只，每周2次。8周后继续造模的同时给与下瘀血汤干预治疗4周，在1、2、4、8、12周末分别处死大鼠并取材；生化法测定大鼠血清ALT活性、Alb、TP和Glb含量，肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量；观察肝组织HE和天狼猩红染色形态学变化；Western印迹法分析肝组织CD68、a-SMA、TGF-β1、MMP-9、MMP-13、TIMP-1和TIMP-2蛋白表达；PCR法观察肝组织MMP-9、TIMP-1和TIMP-2 mRNA表达；明胶酶图法检测肝组织MMP-2和MMP-9的活性。
结果：
1．与正常组相比，模型组大鼠一般状态良好，血清TP和Glb含量在1、2、4、8、12周均显著升高(P<0.01)，血清Alb含量12周明显降低(P<0.01)，血清ALT活性2周明显升高(P<0.05)，4周显著升高(P<0.01)。
2．与正常组相比，4、8、12周模型组大鼠肝组织Hyp含量均显著升高(P<0.01)。1、2、4、8、12周模型组大鼠肝组织病理有不同程度进行性变化，其中，4周时纤维问隔向小叶内伸展，8周时完全的纤维间隔形成，12周时纤维间隔进一步增厚。
3．Western blot结果显示，与正常组相比，模型组大鼠肝组织CD68蛋白表达量，1、2周显著降低(P<0.01)，4、12周显著升高(P<0.01)，8周明显升高(P<0.05)；模型组大鼠肝组织a-SMA蛋白表达量，1周明显升高(P<0.05)，2、4、8、12周显著升高(P<0.01)；模型组大鼠肝组织TGF-β1蛋白表达量，1、2、8周显著降低(P<0.01)，4、12周明显升高(P<0.01)；模型组大鼠肝组织MMP-9蛋白表达量，1、2、4、8周显著降低(P<0.01)，12周明显升高(P<0.01)；模型组大鼠肝组织：MMP-13蛋白表达量，1、4周显著降低(P<0.01)，2、12周显著升高(P<0.01)，8周明显降低(P<0.05)；模型组大鼠肝组织TMP-1蛋白表达量4、8、12周显著升高(P<0.01)；模型组大鼠肝组织TIMP-2蛋白表达量，1、2、8周显著降低(P<0.01)，4、12周明显升高(P<0.01)。
4．PCR结果显示，与正常组相比，模型组大鼠肝组织MMP-9 mRNA表达量，1、8周明显降低(P<0.05)，2周显著升高(P<0.01)，12周显著降低(P<0.01)；模型组大鼠肝组织TIMP-1 mRNA表达量，1、2、4、8、12周均显著升高(P<0.01)；模型组大鼠肝组织TIMP-2 mRNA表达量，1、8、12周显著降低(P<0.01)，2、4周明显升高(P<0.01)。
5．与正常组大鼠相比，模型组大鼠肝组织MMP-2活性，1周明显升高(P<0.05)，2、8、12周均显著升高(P<0.01)；模型组大鼠肝组织MMP-9活性，1周明显升高(P<0.05)，2、4、8、12周均显著升高(P<0.01)。
6．与模型组相比，下瘀血汤组大鼠肝重和脾重明显降低(P<0.05)；血清TP和Glb显著降低(P<0.01)；肝组织Hyp含量显著降低(P<0.01)。肝组织病理显示，下瘀血汤组纤维间隔较模型组薄。
7．与模型组相比，下瘀血汤组大鼠肝组织CD68蛋白表达量明显升高(P<0.05)，a-SMA、TGF-β1和TIMP-2蛋白表达量显著降低(P<0.01)，MMP-9和MMP-13蛋白表达量显著升高(P<0.01)，TIMP-1蛋白表达量明显降低(P<0.05)；下瘀血汤组大鼠肝组织MMP-9 mRNA表达明显升高(P<0.05)，TIMP-1 mRNA 表达显著降低(P<0.01)，TIMP-2mRNA表达显著升高(P<0.01)；下瘀血汤组大鼠肝组织MMP-2活性明显降低(P<0.01)，MMP-9活性显著升高(P<0.01)。
结论：
1．猪血清致免疫性大鼠肝纤维化模型的病理动态变化特点：①1-2周为肝损伤和肝纤维化的启动阶段；②4-8周为肝纤维化的发展阶段，而肝细胞损伤逐渐减轻；③8-12周为稳定性肝纤维化阶段。
2．猪血清致免疫性大鼠肝纤维化模型的病理机制：①体液免疫和脾脏参与细胞免疫引发肝纤维化的启动和发展；②间质细胞为主体的ECM合成与代谢紊乱是本模型发生的细胞学基础，主要是HSCs的活化和KCs的激活；③MMPs/TIMPs调控失衡是ECM代谢紊乱的分子生物学基础，二者失衡导致ECM过度沉积，形成肝纤维化。
3．下瘀血汤有效的干预治疗猪血清免疫性大鼠肝纤维化，提示瘀血阻络是本模型的主要中医病理学基础，其破血逐瘀的作用特点表现在降解过度沉积的ECM。
4．下瘀血汤干预治疗猪血清免疫性大鼠肝纤维化的作用机制：①调节机体免疫反应；②抑制HSCs活化；③调控KCs功能；④调控MMPs/TIMPs蛋白和基因表达，促进ECM降解。