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干扰素具有抗病毒、调节机体免疫功能等多种生物学活性，其速效多能的特点使其在防治病毒性传染病，促进动物健康生长等方面具有重要意义。本研究克隆表达了具有生物学活性的猪γ干扰素，并在筛选出具有抗PRRSV作用中药的基础上，评价了重组猪γ干扰素与中药联合抗PRRSV的效果。1．猪γ干扰素的克隆表达根据GenBank基因库中已登录的猪γ干扰素（Porcine Interferon gamma，PoIFN-γ）基因设计一对引物，通过RT-PCR技术，以猪脾脏总RNA为模板，扩增出了猪γ-干扰素基因，其大小约为500 bp，与理论大小相符。目的片段经纯化回收后，克隆到pMD18-T载体，经序列测定，扩增得到的序列与已报道的猪IFN-γ序列基本一致，同源性在99％以上，发生一个点突变，核苷酸由G突变为A，相应氨基酸由精氨酸突变为组氨酸，但同为碱性、极性氨基酸，将测得的目的基因序列进行分析，得出目的蛋白的理论分子量为18.033 KD，理论等电点为9.54。将PoIFN-γ基因插入大肠杆菌表达载体pET-28a（+），成功构建了重组质粒PoIFN-γ／pET-28a（+），再将其转化入大肠杆菌BL21，在37℃，IPTG终浓度为1 mmol／L条件下诱导4 h，成功表达了重组PoIFN-γ，经SDS-PAGE分析表明，目的蛋白大小约为20 KD，主要以包涵体形式存在，占菌体总蛋白的37.2％。经Western-Blot检测证实，重组PoIFN-γ的N端含有6个组氨酸标签。蛋白经纯化、复性、浓缩，用Vero-VSV系统测得抗病毒效价约为1.3×103 U／mL（5.0×103 U／mg）。为开展中药联合猪γ-干扰素抗病毒的研究及基因工程生产重组PoIFN-γ奠定了基础。2．中药体外抗PRRSV的筛选及联合重组PoIFN-γ抗PRRSV的研究利用Marc-145细胞体外培养系统，通过CPE和MTT法测定了板蓝根、野菊花、穿心莲、黄芪、金银花、鱼腥草、柴胡、黄连、连翘、甘草、黄芩和紫花地丁，共12味中药在Marc-145细胞上的最大无毒浓度（TC0）、半数中毒浓度(TC50)，并筛选了有效的抗PRRSV中药，计算了半数抑制浓度(IC50)和治疗指数（TI）。12味中药对Marc-145细胞的最大无毒浓度（TC0）以及对PRRSV的半数抑制浓度(IC50)分别为：板蓝根31.25 mg／mL，1.38 mg／mL；野菊花7.81 mg／mL，1.30 mg／mL；穿心莲7.81 mg／mL，0.91 mg／mL；黄芪3.90 mg／mL，0.22 mg／mL；金银花31.25 mg／mL，2.08 mg／mL；鱼腥草3.90 mg／mL，0.44 mg／mL；柴胡15.63 mg／mL，2.54 mg／mL；黄连3.90 mg／mL，0.35 mg／mL；连翘7.81 mg／mL，1.28 mg／mL；甘草15.63 mg／mL，2.62 mg／mL；黄芩0.98 mg／mL，0.13 mg／mL；紫花地丁31.25 mg／mL，2.47 mg／mL。重组PoIFN-γ的IC50为99.50 U／mL。12味中药中治疗指数位于前三位的是黄芪、黄芩和板蓝根，其TI分别为70.22，56.47和44.66。综合评价中药抗PRRSV效果和开发价值，选出三味中药（黄芪、黄芩和板蓝根）与重组PoIFN-γ联合在Marc-145细胞上抗PRRSV的研究。通过计算合并指数和Isobologram方法分析，发现黄芪、黄芩和板蓝根分别与重组PoIFN-γ抗PRRSV具有明显的协同作用。