该研究则采用恒河猴着床起始阶段(妊娠第9天)的着床位点为实验材料,通过抑制性消减杂交的方法筛选着床位点差异表达的基因,进一步克隆几个重要基因的全长cDNA,并初步探讨了它们在胚胎植入和妊娠过程中的作用.准确获得妊娠9天恒河猴着床位点和非着床位点后,将SMART PCR cDNA合成技术和抑制性消减杂交(SSH)相结合,成功构建了恒河猴着床位点的消减cDNA文库.继而,从消减文库中随机挑选376个克隆,通过点杂交和virtual Northern印迹,证明其中有76个克隆在着床位点有明显差异表达.通过基因测序和BLAST分析,发现这些76个克隆中,有73个与人或恒河猴猴的已知基因具有同源性,分别对应于31个不同的已知基因;有2个克隆同源于人的一个EST;一个克隆同源于人的染色体序列,可能是一个新的基因.将上述不同的序列以EST形式投送Genebank,获得了注册号.着床点差异表达的阳性克隆中,有15个均与人S100A10基因的cDNA片段同源,表明恒河猴着床位点S100A10基因有高丰度差异表达.着床点差异表达的阳性克隆中,包括IGF结合蛋白超家族的成员IGFBP-7.通过RACE得到恒河猴IGFBP-7的3端cDNA片段,与人的相应序列相比,具有98﹪的同源性.进一步研究了IGFBP-7在妊娠恒河猴母胎界面分布的时空变化.原位杂交和免疫组化均表明IGFBP-7在妊娠早期母胎界面分布较广泛;在妊娠第9天,IGFBP-7主要表达于腺上皮和腔上皮细胞,基质细胞也有表达.此外,组织学形态观察发现,妊娠第九天着床位点的结构与非着床位点相比发生了很大的变化.总之,该工作通过SSH筛选获得恒河猴妊娠初始阶段着床位点差异表达的基因片段及几个基因的全长cDNA序列.为进一步研究胚胎植入时母胎对话的分子基础提供了重要信息.