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冬虫夏草是我国名贵的中药材,而蛹虫草是第一个能完全实现人工栽培的虫草属真菌。实现蛹虫草的大规模培养是解决虫草资源匮乏的有效途径之一。本实验从实验室保藏的三株蛹虫草菌株出发,对蛹虫草的人工培养及有效成分分析做了如下工作:1.以蛹虫草菌丝形态,及液体和固体发酵能力为指标,对实验室保藏的三株菌株进行筛选,得到C3菌株的菌丝生长健壮、液体和固体发酵能力优良。因此,将C3菌株作为实验菌株。2.实验发现,蛹虫草菌株极易退化,退化后的菌株表现出液体发酵副产物增多、固体发酵周期延长及固体发酵不产子实体等现象。本实验从常规保藏方法入手,得到保藏蛹虫草的最佳培养基为PDA培养基,于4℃低温保藏时间不宜超过4个月,4个月后就要活化一次,活化传代次数不宜超过4代。3.通过对蛹虫草液体发酵培养基和发酵条件的单因素实验和正交实验,得到蛹虫草液体发酵最佳培养基为:蔗糖2.0%,蛋白胨0.8%,KH2PO40.5%,MgSO40.25%。最佳发酵条件为:种龄为120h(五天),接种量为10%,发酵液初始pH自然,装液量为200ml/500ml,摇床转速为130r/min,培养温度为24℃;在最佳发酵培养基和发酵条件下,得到最大菌丝生物量为13.9g/L,多糖量为46.8mg/g。4.对蛹虫草固体发酵生产子实体的碳源、氮源和料液比进行了单因素实验,得到最佳碳源为麦仁,最佳氮源为蚕蛹粉,最佳料液比为1:1.2;对蛹虫草出草期子实体的光温条件进行了优化,得到适宜子实体生长的温度为24℃。光照是蛹虫草生长子实体的必要条件,实验得到合适的光照时间是每天16小时以上。5.对人工培养的蛹虫草子实体中虫草素的浸提工艺进行了优化。虫草素的检测方法选用毛细管电泳法。对浸提液、料液比、浸提温度和浸提时间进行了单因素实验和正交实验,得到虫草素最佳提取液为60%乙醇、料液比为1:20、浸提温度为70℃、浸提时间为9h。