3-磷酸肌醇激酶(phosphoinositide3-kinase,P13K)家族是众多原癌基因中极重要的一员,参与多种信号通路,调节细胞的主要生理功能。由P13K与AKT组成的P13K-AKT信号通路在细胞的增殖以及凋亡等过程中发挥至关重要的作用。本试验采用PCR产物直接测序法寻找PIK3CA和AKT3基因的遗传变异,应用PCR-RFLP技术对欧洲大白兔、伊拉兔D系和福建黑兔3个肉兔品种共711个个体进行基因型分析,探讨家兔PIK3CA和AKT3基因的多态性及其与家兔生长速度的相关性。随后选取出生后1d的新西兰仔兔为实验材料,进行分离、纯化家兔骨骼肌卫星细胞(Skeletal muscle satellite cells,S Cs),并采用siRNA介导的PIK3CA和AKT3基因进行基因的沉默表达,研究其在家兔SCs增殖过程中发挥的作用。主要结果如下：1.通过PCR产物直接测序,在PIK3CA基因序列上共找到6个SNPs位点,分别为：g.12178A>G、g.12388C>T、g.12605T>C、g.12711C>G、c.3068A>G和c-3377G>C。其中c.3068A>G为同义突变,位于外显子20。对该位点采用PCR-RFLP的技术进行基因分型并进行关联性分析。、结果发现：c.3068A>G位点在欧洲大白和福建黑兔群体中,AG基因型个体的35、56和70日龄体重均显著高于GG基因型个体(P<0.05),在伊拉兔D系群体中AG基因型个体35-70日龄的平均日增重则极显著高于GG基因型个体(P<0.01)。2.AKT3基因序列上检测到2个SNPs位点,分别为：c.1213A>C和g.258389T>C。其中c.1213A>C为同义突变,位于外显子10。关联性分析表明：c.1213A>C位点在欧洲大白兔群体中,A.A基因型个体的35、56和70日龄体重均显著高于CC基因型个体(P<0.05)3.针对PIK3CA和AKT3基因,分别采用三对特异的siRNA序列转染SCs,然后qRT-PCR法检测在浓度分别为25nM.50nM.75nM和100nM情况下,转染组和对照组中PIK3CA和AKT3基因mRNA的相对表达量。结果发现使用50nM的si-PIK3CA-003和50nM的si-AKT3-001对细胞内靶基因的mRNA表达水平均有理想的下调作用,对靶基因的抑制效率分别为85.16%和83.93%。4.对处于对数生长期的细胞转染si-PIK3CA-003或si-AKT3-001 48h后,分别对靶基因和上下游基因PTEN和FoxO1进行qRT-PCR反应。结果表明：在转染si-PIK3CA-003后,PIK3CA和AKT3基因的相对表达量均显著下调,PTEN和Foxo1基因的表达量均显著上调;当转染了si-AKT3-001后,PTEN和Fox01基因表达量均显著上调。表明PTEN、FoxO1基因与PIK3cA、AKT3基因的相对表达量呈负相关。5.选取处于对数期的SCs进行转染实验,采用CCK-8试剂盒通过酶标仪检测其在转染si-PIK3CA-003或si-AKT3-001后细胞增殖能力的改变。结果发现：转染实验组OD值显著低于空白对照组(P<0.05),说明通过转染实验下调PIK3CA和AKT3基因表达后,细胞增殖能力均有显著的下降。说明PIK3CA和AKT3在SCs的增殖过程中起到重要的作用,能够正向调控肌细胞的增殖。家兔PIK3CA和AKT3基因CDS区的SNPs与生长速度相关,PIK3CA和AKT3基因可作为影响家兔生长速度的重要候选基因,为采用分子育种提高家兔生产性能提供理论依据。通过对PIK3CA和AKT3基因抑制表达,发现PIK3CA和AKT3基因能够正向调控肌细胞的增殖,初步探讨了PIK3CA和AKT3基因在家兔骨骼肌发育过程中的作用。