【摘 要】
:
目的:二氧化硅作为一种重要的原料被广泛应用,在生产加工过程中会产生游离的二氧化硅颗粒,即矽尘。吸入矽尘可导致一系列疾病,其中以慢性炎症和进行性肺纤维化为特征的矽肺是世界上最重要的职业病之一。越来越多的研究支持上皮细胞通过上皮间质转化(EMT)的方式转化为肌成纤维细胞,促进纤维化的发展。本研究应用A549细胞系探讨矽尘在上皮间质转化中的可能作用机制,为矽尘所致疾病的预防与治疗提供新的方向。研究方法:
【基金项目】
:
国家自然科学基金(No.81773376);
论文部分内容阅读
目的:二氧化硅作为一种重要的原料被广泛应用,在生产加工过程中会产生游离的二氧化硅颗粒,即矽尘。吸入矽尘可导致一系列疾病,其中以慢性炎症和进行性肺纤维化为特征的矽肺是世界上最重要的职业病之一。越来越多的研究支持上皮细胞通过上皮间质转化(EMT)的方式转化为肌成纤维细胞,促进纤维化的发展。本研究应用A549细胞系探讨矽尘在上皮间质转化中的可能作用机制,为矽尘所致疾病的预防与治疗提供新的方向。研究方法:本研究应用A549细胞系构建矽尘诱导的上皮间质转化模型,分为生理盐水对照组和不同剂量二氧化硅(50、100、150、200、250μg/ml)暴露组,于24h、48h、72h收集细胞,采用Western Blot方法检测EMT相关蛋白以及半乳糖凝集素-3(Gal-3)的表达情况,用划痕实验检测细胞的迁移能力,用Western Blot和免疫荧光技术检测GSK-3β/β-catenin通路相关蛋白的表达情况。通过小干扰RNA(si RNA)构建Gal-3敲低的A549细胞系,分为生理盐水对照组(si NC+saline)、矽尘模型组(si NC+silica)、敲低对照组(si Gal-3+saline)以及敲低模型组(si Gal-3+silica)四个实验组,矽尘(250μg/ml)暴露48h后收集细胞进行后续检测。结果:1、矽尘暴露诱导A549细胞发生EMT。矽尘刺激组的细胞形态较对照组发生明显改变,细胞的迁移能力增强。Western Blot结果分析表明,矽尘暴露组的A549细胞中E-cadherin蛋白表达降低,vimentin和α-SMA蛋白表达升高(P<0.05)。2、矽尘暴露使A549细胞中Gal-3表达升高,敲低Gal-3可以减轻矽尘诱导的EMT。0~250μg/m L的二氧化硅悬液诱导A549细胞中Gal-3剂量依赖性增加,250μg/m L的二氧化硅悬液诱导的Gal-3增加在72 h达到峰值。通过小干扰RNA构建Gal-3敲低的A549细胞系,Western Blot和Realtime-PCR证明Gal-3被敲低。与矽尘组相比,Gal-3敲低矽尘组的E-cadherin蛋白表达升高,α-SMA和vimentin蛋白表达降低(P<0.05)。3、Gal-3通过调控GSK-3β/β-catenin信号通路,促进A549细胞中矽尘诱导的EMT。与生理盐水对照组相比,给予二氧化硅悬液刺激后,A549细胞中p-GSK-3β和active-β-catenin蛋白表达显著增加。免疫荧光检测显示核内β-catenin积聚。给予si RNA干扰后,与矽尘暴露组相比,Gal-3敲低模型组的p-GSK-3β和active-β-catenin蛋白表达下降,β-catenin的核转移减少。结论:1、矽尘暴露诱导A549细胞发生EMT。2、矽尘暴露使A549细胞中Gal-3表达升高,敲低Gal-3可以减轻矽尘诱导的EMT。3、Gal-3通过调控A549细胞中GSK-3β/β-catenin信号通路促进矽尘诱导的EMT。
其他文献
目的:甲基汞(Methylmercury,MeHg)是一种广泛存在于环境中的神经毒物。人类接触MeHg的主要途径是食用受污染的海洋产品,中枢神经系统对其毒性作用尤为敏感。研究发现,内质网(Endoplasmic Reticulum,ER)是MeHg神经毒性的重要靶点,MeHg可通过诱导ER应激参与调控跨膜蛋白合成、钙离子转运等过程,进而引起细胞损伤。DNA甲基化是目前研究最为深入的表观遗传机制,通
目的:锰(Manganese,,Mn)作为一种促进细胞正常生长、发育及维持稳态所必需的微量元素,对中枢神经系统(The central nervous system,CNS)的正常发育至关重要。但是接触过量的锰会使锰在脑内蓄积,导致神经毒性。越来越多的证据表明,氧化应激和神经炎症是神经毒性的重要病理原因。锰使活性氧(Reactive oxygen species,ROS)过量产生,并且神经胶质细胞
目的:锰(Manganese,Mn)是人体必需的微量元素,并作为多种代谢酶和抗氧化酶的辅助因子在各种生理过程和酶促反应中发挥着重要作用。锰也是重金属环境污染物,可以通过血脑屏障和血脑脊液屏障进入到中枢神经系统,在纹状体中优先积累并诱发锰中毒。在过去的几十年中,越来越多的研究集中在锰诱导线粒体功能障碍的细胞和分子机制上。有研究表明,锰对线粒体有很强的亲和力,并且锰的神经毒性与线粒体功能障碍有很强的关
作为党的二十大的重大理论创新成果,中国式现代化的理论体系由独创性的现代化概念、命题、范畴作为理论标志,由特定的现代化研究范式作为方法论支撑,由原创的现代化理论叙事组成内容结构。作为一种崭新的现代化理论形态,中国式现代化的理论体系建立在对“历史终结论”与“西方中心论”的反思之上,以历史唯物主义作为哲学基础,将人民至上作为价值内核。从内容结构上看,中国式现代化的“领导力量论”“本质属性论”“中国特色论
目的:砷是一种广泛存在于自然环境中的类金属,砷对神经系统造成的损伤是其主要毒理作用之一。目前关于砷暴露的毒作用机制已有大量研究,但关于砷暴露诱导多巴胺神经递质释放减少的具体机制鲜有报道。本文拟探究NaAsO2能否诱导自噬阻滞导致α-syn寡聚化,从而抑制突触囊泡对接停靠、减少多巴胺神经递质释放,为防控砷暴露导致神经损伤提供新思路。方法:采用SH-SY5Y细胞系进行实验,CCK8(Cell Coun
目的:邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(Di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP)是用于塑料、个人护理产品和建筑装饰材料等产品的化工产品,由于普遍使用引起了人群广泛的暴露。大量研究表明,DEHP具有神经毒性,可损伤中枢神经系统,导致神经行为学方面的异常。尤其值得关注的是,这种毒性效应可能会通过跨代遗传,导致非直接暴露的后代出现神经发育损伤。本研究通过建立母体孕哺期DEHP跨代暴
目的:邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP)广泛存在于日用品中,是一种常见的内分泌干扰物(endocrine-disrupting chemicals,EDCs),人们可通过多种途径接触吸收。近年来,其神经毒性受到人们的广泛关注。小胶质细胞(microglia,MG)是中枢神经系统(central nervous system,CNS)中的常
目的:一氧化碳(carbon monoxide,CO)是一种无色无味的窒息性气体,由含碳物质不完全燃烧产生。当人体吸入浓度超过0.05%的CO时就可发生中毒反应。急性CO中毒在生活环境和职业环境中都很常见,是严重危害劳动者身体健康的常见职业危害之一,部分急性CO中毒患者苏醒后,经过2~60天的假愈期,会出现以痴呆、精神症状和锥体外系损伤症状为主的异常表现,称为急性一氧化碳中毒迟发性脑病(delay
该文梳理了面向学生核心素养教育的新课程标准中大概念教学、单元教学与综合课程、教学评价改革等变革性内容对教师专业发展提出的新要求,阐述了链接型数字教材、嵌入型数字教材、智能交互型数字教材的功能结构,提出了虚实融合的合作教学空间、虚实融合的交互教学空间、虚实融合智能教学空间的构成及对课程改革的支撑作用,分析了教学过程数据促进教学评价变革的路径。提出培训课程场景化,数字素养提升融入课改全流程,强化县区教