近年来荧光超分辨成像系统得到了很大发展,它能够突破衍射极限的限制观察到细胞的内部结构,并且不影响生物样品的活性,因此使其在生物医学领域中得到了广泛的应用。本文介绍了一种新型的基于荧光漂白现象的超分辨显微方法,并结合以下几个方面：荧光的产生机理,荧光分子,单分子定位的基本原理,单分子定位算法以及荧光漂白现象,详细的介绍了该方法的基本原理。该方法充分利用了荧光的随机漂白性,通过对获取的荧光漂白图像进行差分处理,获得大量稀疏的荧光分子图像,相应的荧光分子被一一区分并通过PSF数字化的方法计算出中心位置,从而重构超分辨显微图像。一般的在荧光显微镜中都是使用宽场照明,因为宽场照明具有成像视场大,时间少等优点,但是由于存在较大的背景噪声,会影响最终的成像效果,因此论文提出了改进方法,使用全内反射荧光照明,利用全反射产生的倏逝波激发样品,发出荧光,实验结果表明该改进方法能有效减少背景噪声,提高图像信噪比。论文首先对该方法进行了数值模拟,验证了该方法的可行性,并分别讨论信噪比,图片张数以及平均荧光分子漂白数对最后获得的图像分辨率的影响。最后设计并搭建了实验系统,在宽场照明和全内反射照明这两种不同的照明方式下进行实际成像实验,测试该方法的显微性能,发现该方法能够有效提高原有成像系统的分辨率,实现超分辨显微。