鹰嘴豆黄酮的提取、分离纯化及初步结构表征

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鹰嘴豆为豆科草本植物,一年生或越年生草本植物,耐干旱,耐贫瘩,是一种黄酮类化合物含量高且在营养学上有意义的食物资源,为有效开发利用鹰嘴豆,本论文对其黄酮成分的提取、分离、结构表征进行了研究,本文以鹰嘴豆为原材料,优化鹰嘴豆黄酮提取工艺;运用大孔树脂对其粗黄酮进行初步纯化,并优化其纯化工艺;运用柱层析,薄层层析,重结晶等分离提纯技术,对鹰嘴豆的化学成分进行研究,从鹰嘴豆的乙酸乙酯萃取部位分离出两个化合物,通过紫外光谱,红外光谱,核磁共振氢谱技术结合物理常数、化学方法进行分析。具体研究成果如下:1.釆用有热水法,研究提取时间、提取料液比、提取温度以及提取次数四个单因素对黄酮提取量的影响。以总黄酮提取量为指标,设计4因素4水平正交试验优化提取工艺,得出提取时间、提取料液比、提取温度四个参数的最佳组合为提取温度90℃,时间100min,料液比1∶30,提取次数2次。运用最优方案进行提取,鹰嘴豆黄酮的提取率可达3.52%。2.釆用有微波辅助提取法,研究乙醇浓度、提取时间、微波功率以及提取固液比四个单因素对黄酮提取量的影响。影响微波辅助提取的因素依次为乙醇浓度、提取时间、微波功率、固液比。在单因素实验的基础上,通过正交实验,得到微波辅助提取法最佳提取工艺,即乙醇浓度80%,提取时间3.0min,微波功率800W,固液比1:30。运用最优方案进行提取,鹰嘴豆黄酮的提取率可达3.76%。3.釆用有超声波辅助提取法,研究乙醇浓度、固液比、超声时间以及提提取次数四个单因素对黄酮提取量的影响。在单因素实验的基础上,通过正交实验,得到超声波辅助提取法最佳提取工艺,即即乙醇浓度90%,固液比1:40,超声时间50min,提取次数2次。运用最优方案进行提取,鹰嘴豆黄酮的提取率可达3.62%。4.以吸附量和洗脱率为指标,比较AB-8和D101大孔树脂对鹰嘴豆黄酮静态吸附和动态吸附能力,得出AB-8更适合鹰嘴豆总黄酮的纯化。分别优化AB-8对鹰嘴豆总黄酮静态吸附和动态吸附工艺,结果表明:静态吸附优化工艺为吸附料液比=1:5、洗脱料液比=1:20、洗脱液乙醇浓度=80%、洗脱液pH=4;动态吸附优化工艺为上样流速lmL/min、上样体积3BV、冼脱流速1.5mL/min、洗脱体积3BV、洗脱液pH=4。在优化条件下动态吸附后总黄酮纯度可达33.65%,远高于静态吸附19.86%。5.运用柱层析,薄层层析,重结晶等分离提纯技术,对鹰嘴豆的化学成分进行研究,从鹰嘴豆的乙酸乙醋萃取部位分离出两个化合物,通过紫外光谱,红外光谱,核磁共振氢谱技术结合物理常数、化学方法进行分析,初步表征了这两个化合物的结构,分别为:榭皮素和染料木素。
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