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目的:慢性病毒性肝炎是一种严重危害人类健康的常见病,多发病,目前尚缺乏理想的实验动物模型来阐明其具体的发病机制,从而使得对其防治的研究受到很大的局限。本课题拟克服现有模型所存在的不足,建立一种更为理想的慢性病毒性肝炎实验动物模型,为慢性病毒性肝炎发病机制的研究以及防治提供新的理论依据。在此模型基础上我们对其外周血及脾脏T细胞亚群的动态变化做初步观察,以探讨病毒性肝炎慢性迁延免疫机制,并为其免疫治疗提供一些新的思路。方法:取6~-8周龄雌性C3H/HeJ小鼠60只,将纯化MHV-3病毒进行稀释,以10pfu/200ul/只行C3H/HeJ小鼠腹腔注射,然后对其一般情况、生存曲线进行观察,并于病毒感染后4、6、8、9、10、12、15、20、25、30及40天各取C3H小鼠三只行肝脏组织病理学、血液生化指标以及肝脏组织病毒滴度的变化进行检测。同时采用流式细胞仪检测感染后相应时间点外周血、脾细胞悬液中T淋巴细胞亚群包括CD3~+CD4~+CD8~-、CD3~+CD4~-CD8~+、CD3~+CD4~+CD25~+及CD3~+CD4~-CD8~-T(DN T)细胞的细胞数及各自在T淋巴细胞中所占比率。以生理盐水注射组小鼠作为对照。结果:C3H/HeJ小鼠感染MHV-3后,6天左右开始出现少部分小鼠死亡,约63%存活,存活下来的小鼠一般情况较正常对照组差,肝脏组织呈现持续炎性改变,血清ALT、AST升高而TP、ALB有所下降,且肝脏组织病毒滴度增高,呈现持续病毒复制,与人类慢性病毒性肝炎的发生发展极为类似。其外周血中及脾脏中CD3~+CD4~+CD25~+及CD3~+CD4~-CD8~-T(DN T)细胞在T细胞中的比率有升高的趋势。结论:本研究所建立的实验动物模型与人类慢性病毒性肝炎的发生发展极为类似,在目前尚无更好的模型的前提下,不失为一种较为理想的慢性病毒性肝炎实验动物模型。其外周血及脾脏中CD3~+CD4~+CD25~+及CD3~+CD4~-CD8~-T(DN T)细胞比率的升高趋势提示这两类细胞可能在慢性病毒性肝炎发生、发展中起着一定的作用。本研究的意义:本实验所选鼠肝炎3型病毒(MHV-3)易于体内、体外培养, C3H/HeJ小鼠遗传背景清晰,所建模型成本相对低廉,重复性好,同时也克服了已有慢性病毒性肝炎动物模型体内缺乏病原体复制而与临床情况显著不同的局限性,使系统性、动态性研究慢性病毒性肝炎的遗传控制因素及分子生物学、分子免疫学发病机理等成为可能,为其防治提供新的理论依据。在目前尚无完善的慢性病毒性肝炎动物模型的情况下,不失为一种较好的慢性病毒性肝炎动物模型。目前免疫调节T细胞包括CD3~+CD4~+CD25~+及CD3~+CD4~-CD8~-T(DN T)等的研究是一个热点,我们在此模型基础上对外周血及脾脏中T细胞亚群的动态变化进行了初步观察,发现在此模型中这两群调节T细胞的比率都呈现上升趋势,提示这两类细胞可能在慢性病毒性肝炎发生、发展中起着一定的作用,为慢性病毒性肝炎中免疫调节T细胞的具体作用及机制的深入研究打下基础。