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【目的】 研究间苯三酚（phloroglucinol，PG）对大鼠骨折愈合的影响，并在细胞水平探讨其分子机制，确定其作用靶点。 【方法】 1. 建立SD大鼠骨折模型。在大鼠右腿股骨进行骨折手术，手术后大鼠随机分为模型组及间苯三酚低、中、高剂量组。骨折手术后立即进行X光拍片，3日后间苯三酚给药组按9mg/kg、18mg/kg、36mg/kg的剂量给予灌胃，模型组给予双蒸水灌胃。持续治疗 8 周，隔两周拍一次 X光，跟踪骨折愈合情况。实验结束后，取血清和右腿股骨，进行血清骨钙素（Osteocalcin, OCN）、骨生物力学、骨微结构及蛋白表达检测。 2. 繁殖SD大鼠，以新生24h内的乳鼠颅盖骨取材，培养出稳定的成骨细胞用于后续实验。 3. 以 MTT 法检测间苯三酚对成骨细胞增殖的影响；划痕实验及 Transwell实验检测其对成骨细胞迁移能力的影响；Western blot法及real-time PCR法检测相关蛋白和基因的表达。 4. 利用β-catenin抑制剂Wnt C59及RNA干扰技术干预成骨细胞，探讨间苯三酚促进成骨细胞迁移的作用靶点。 【结果】 1. 以SD大鼠造骨折模型，并以灌胃方式给予间苯三酚。手术大鼠分组为：给药浓度为9mg/kg的间苯三酚低剂量组（LPG）、18mg/kg的间苯三酚中剂量组（MPG）、36mg/kg的间苯三酚高剂量组（HPG），模型组（Control）给予生理盐水。以X光片追踪大鼠的骨折愈合情况，给药8周后可见骨折部位已逐渐连接，部分骨痂已完全骨化，骨折线逐渐消失，进入骨折愈合期。检测结果显示，各给药组的骨形成指标骨钙素相较于对照组均有所上升，其中以MPG组上升最多（P＜0.05）。在骨生物力学相关指标中，与对照组相比，给药组最大载荷、断裂载荷和刚性均有所增加。Micro CT结果显示，间苯三酚总体表现出可提高骨密度、增加骨小梁厚度及减少骨小梁分离度的趋势。Western blot结果提示间苯三酚可促进大鼠骨折部位的β-catenin和cyclin D1表达（P＜0.05）。 2. 在体外培养的成骨细胞实验中，以不同浓度的间苯三酚处理成骨细胞48h后，成骨细胞增殖未受抑制，而10-8 mol/L、10-7 mol/L、10-5 mol/L的间苯三酚则能促进成骨细胞增殖，与对照组相比，10-8 mol/L组具有统计学意义（P＜0.05）。 3. 对成骨细胞划痕并以10-8～-4 mol/L的间苯三酚干预。作用12h后，结果显示，10-6 mol/L、10-5 mol/L与10-4 mol/L间苯三酚给药组划痕愈合速度优于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。作用24h后，10-6 mol/L、10-5 mol/L与10-4 mol/L间苯三酚给药组划痕基本愈合完全，差异有统计学意义（P＜0.05）。 4. 选取 10-7 mol/L、10-6 mol/L 及 10-5 mol/L 三个浓度的间苯三酚用于Transwell实验。小室在6h、12h、24h后染色并置于倒置显微镜观察，与对照组相比间苯三酚给药组成骨细胞穿过数量更多，6h后10-6 mol/L间苯三酚组透膜的数量最多，差异有统计学意义（P＜0.05）。作用12h后，10-6 mol/L、10-5 mol/L间苯三酚组透膜的细胞数量都有明显上升，差异有统计学意义（P＜0.05）。作用24小时后，各实验组的透膜细胞的细胞数量均显著上升，差异有统计学意义（P＜0.05）。 5. 选取10-7 mol/L、10-6 mol/L、10-5 mol/L三个浓度的间苯三酚用于Western blot实验，作用细胞24h后，与对照组相比，各实验组细胞β-catenin和cyclin D1的表达增加。 6. 选取 10-7 mol/L、10-6 mol/L 及 10-5 mol/L 三个浓度的间苯三酚用于Real-time PCR实验。相比空白对照，β-catenin和TCF4基因表达均有上升趋势，其中10-6 mol/L、10-5 mol/L处差异有统计学意义（P＜0.05）。cyclin D1表达显著升高，尤其在10-6 mol/L处。10-6 mol/L及10-5 mol/L的间苯三酚能够使LEF1表达显著上升（P＜0.05）。 7. 采用 10-2 mol/L 的 β-catenin 抑制剂 Wnt C59 干预成骨细胞后加入 10-6 mol/L的间苯三酚，划痕实验及Transwell实验结果表明，在Wnt C59的影响下，成骨细胞的迁移能力及β-catenin表达下降，而间苯三酚则可有效地逆转Wnt C59对成骨细胞迁移能力的影响，差异有统计学意义（P＜0.05） 8. 对成骨细胞进行 β-catenin siRNA 转染并以间苯三酚干预，划痕实验及Transwell实验结果均显示，10-6 mol/L的间苯三酚可有效提高β-catenin沉默后成骨细胞的迁移能力，差异有统计学意义（P＜0.05）。 9. 转染β-catenin过表达质粒后，分别用Wnt C59、β-catenin siRNA和间苯三酚处理细胞。结果显示，β-catenin过表达可促进成骨细胞的迁移能力（P＜0.05）；过表达后使用Wnt C59或siRNA均能抑制由于β-catenin高表达带来的迁移能力增加（P＜0.05）；而间苯三酚与β-catenin过表达质粒同时处理成骨细胞，能协同促进其迁移能力增加，同时逆转Wnt C59、β-catenin siRNA对β-catenin过表达细胞迁移能力的抑制作用（P＜0.05）。 【结论】 1. 间苯三酚可促进骨折大鼠愈合，增加骨形成、最大载荷、断裂载荷和刚性，有提高骨密度、增加骨小梁厚度及减少骨小梁分离度的趋势。 2. 间苯三酚促进大鼠骨折愈合的其作用机制可能为：激活Wnt/β-catenin信号通路从而增加大鼠成骨细胞的迁移能力。