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哺乳动物胚胎植入是一个复杂且协调的过程。胚胎的成功植入需要良好容受性的子宫内膜和具有黏附能力的健康囊胚,以及两者之间的相互协调作用。在山羊胚胎附植期,子宫内膜在P4、E2和IFNτ等激素的共同作用下发生动态改变,从而为胚胎附植提供最佳的子宫内环境。子宫内膜上皮细胞作为囊胚的第一个接触点,在子宫内膜容受性形成阶段发生重塑,形状从柱状变成立方状、顶端微绒毛减少。伴随着结构的改变,子宫内膜上皮细胞的分泌和粘附等功能也发生变化。尽管大量参与山羊胚胎附植过程的基因、调控因子和分子网络被发现,但是激素如何调控子宫内膜容受性形成阶段子宫内膜上皮细胞的重塑及其调控机制仍不清楚。Msx基因家族作为同源盒基因最古老,最保守的家族之一在胚胎发育、器官发生和肿瘤发生等复杂过程中起着重要的作用。研究发现Msx1参与调节小鼠容受性子宫内膜形成期间子宫内膜上皮细胞极性的改变,同时在妇女不孕症中也发现Msx1的异常表达。但是其在山羊胚胎附植期的作用以及调节机制尚不清楚。本研究利用P4、E2和IFNτ联合作用模拟山羊妊娠早期子宫内膜上皮细胞所处的激素环境。通过RT-q PCR、Western Blot、慢病毒介导干扰、细胞免疫荧光染色、转染过表达载体、ELISA和细胞球粘附等方法,研究Msx1对子宫内膜上皮细胞重塑的影响。主要结果如下:(1)山羊子宫内膜上皮细胞中Msx1的表达受到P4和E2直接或间接的调控。P4、E2和IFNτ共同作用山羊子宫内膜上皮细胞时,促进Msx1的表达。激素联合作用下CDH2表达量升高,上皮极性蛋白基因par3、α-PKC、scribble、Lgl2和紧密连接分子ZO-1、occludin转录水平下降。(2)设计并构建了针对山羊Msx1干扰载体p CD513B-U6-sh Msx1,慢病毒包装获得病毒液感染子宫内膜上皮细胞并检测慢病毒干扰效率。P4、E2和IFNτ共同作用下,干扰Msx1的表达下调了促孕体伸长基因ISG15、CXCL10和RSAD2的m RNA水平,降低了胎盘滋养层细胞球的粘附率,促进了PGF2α的分泌。同时抑制了CDH2的表达,上调了par3、α-PKC、scribble、Lgl2和ZO-1、occludin的m RNA表达水平。没有激素刺激下,通过转染过表达载体GV362-Msx1上调Msx1的表达促进了CDH2的表达、抑制了上皮极性蛋白基因par3、α-PKC、scribble、Lgl2和紧密连接分子ZO-1、occludin的转录水平。促孕体伸长基因ISG15、CXCL10和RSAD2的表达也极显著的升高。(3)激素联合作用下干扰EECs中Msx1的表达抑制了UPR通路标志蛋白phopho EIF2S1、phopho IRE1和XBP1的表达,但对Cleaved ATF6没有显著影响。内质网应激激活剂Tg预处理sh Msx1 EECs恢复了Msx1表达抑制导致的CDH2表达的降低,降低了par3、α-PKC、scribble、Lgl2和ZO-1、occludin的m RNA水平。内质网应激抑制剂4-PBA预处理sh Msx1 EECs增强了Msx1表达抑制导致的CDH2表达降低、促进了scribble、Lgl2和ZO-1、occludin基因的转录。综上所述,本研究发现Msx1作为激素调节基因,在山羊早期妊娠阶段激素调控子宫内膜上皮细胞重塑中具有重要作用。为进一步研究山羊妊娠早期激素调控子宫内膜重塑提供了试验依据。