研究背景与目的泛素特异性蛋白酶22(Ubiquitin-specific protease 22,USP 22)是泛素蛋白特异性蛋白酶家族(ubiquitin-specific protease,USPs)中的一员,属于去泛素酶家族。泛素特异性蛋白酶是去泛素酶家族中最大且最具特异性的亚家族,具有物种和组织特异性,其核心催化域约由350个氨基酸组成。这些酶含有2个赖氨酸盒和组氨酸盒短而保守的片段,能将从相对分子质量较大的蛋白质底物中移除泛素分子并使其参与再循环。因此泛素特异性蛋白酶可以通过对组蛋白去泛素化作用来调控下游基因的转录,从而调控肿瘤的发生、发展。USP22被鉴定为人染色质重组复合体即SAGA(Spt-Ada-Gcn5乙酰转移酶)转录调控复合物的保守组分,USP22通过其对组蛋白H2A和H2B的单去泛素化来调节基因的转录。此外研究发现,USP22通过去泛素化促进多种癌症相关靶标蛋白的稳定性进而影响癌基因积累,或利用去泛素化作为调节蛋白质功能和促进细胞增殖的手段。USP22的表达上调与多种癌症中的发生发展及不良预后相关。基于以上背景,本文旨在通过相关实验研究,探讨USP22对胃癌发生发展及淋巴结转移的生物学影响及其作用机制。研究对象和方法1.搜集并分析62例患者相关临床资料:年龄、性别、肿瘤病理TNM分期、分化程度、淋巴结转移情况等。2.通过免疫组织化学染色方法对62例患者胃癌组织及配对正常胃粘膜组织石蜡切片中USP22蛋白表达水平进行检测,并通过Western blot方法检测胃癌细胞MGC-803、SGC-7901中USP22蛋白表达水平。3.设计siRNA沉默USP22,通过流式细胞仪检测胃癌细胞MGC-803周期变化及细胞凋亡水平,并通过Western blot方法检测MGC-803中EMT相关蛋白水平。4.通过MTT实验检测细胞增殖情况,通过细胞侵袭实验检测细胞侵袭能力。研究结果1.USP22在胃癌组织及胃癌细胞系中高表达,且与病理TNM分期、肿瘤分化程度有着密切的关系。2.USP22下调可以抑制胃癌细胞增殖和体外侵袭能力,且抑制作用随着时间的增加而增强。3.USP22下调可以抑制胃癌细胞中EMT过程的发生。显著增加E-钙粘蛋白(上皮标志物)的表达,同时降低N-钙粘蛋白和波形蛋白(间充质标志物)的表达。4.USP22下调可以促进细胞凋亡并阻滞细胞周期于G0/G1期。结论泛素特异性蛋白酶22下调可以抑制胃癌增殖、迁徙和转移,并可以抑制胃癌中EMT过程。