益气化瘀补肾方对脊髓慢性损伤影响的实验研究

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目的:探索益气化瘀补肾方对慢性脊髓损伤的作用及机理,初步了解其在“围手术期”治疗中的作用原理,从而为该药在脊髓型颈椎病的防治和“围手术期”治疗中提供理论依据。 方法:以脊髓型颈椎病为研究点,以大鼠慢性压迫模型及减压模型为基础,以BBB功能评分进行脊髓功能评定并分级;以光镜、电镜观察脊髓慢性受压后组织形态学的改变;以Tunel法、流式细胞仪分析观察神经细胞凋亡的情况;以免疫组化方法观察脊髓中凋亡抑制蛋白Bcl-2表达;以生化酶标板微孔检测法检测脊髓组织中PLA2的含量;以实时荧光定量RT-PCR方法检测脊髓组织中NGFmRNA、BDNFmRNA的表达。 结果:建立了不同程度损伤的脊髓慢性压迫模型,同时发现减压对轻、中度脊髓慢性损伤有明显的逆转作用(P<0.01),益气化瘀补肾方、弥可保有一定保护作用(P<0.05~0.01),减压联合用药与单纯减压相比有一定积极作用(P<0.05)。脊髓慢性受压后神经元凋亡和坏死并存,白质中可见脱髓鞘改变,轴索消失,融合,严重者被瘢痕组织代替,程度与功能相关。压迫后脊髓组织中bcl-2蛋白表达增加(P<0.05~0.01);PLA2含量明显增高(P<0.05~0.01);NGFmRNA、BDNFmRNA表达均增强(P<0.05~0.01)。减压后脊髓组织中PLA2含量明显减少(P<0.05~0.01),NGFmRNA、BDNFmRNA表达也明显降低(P<0.05~0.01),bcl-2蛋白表达虽明显降低,但无统计学意义(P>0.05)。益气化瘀补肾方治疗后脊髓组织中PLA2含量明显减少(P<0.05~0.01);NGFmRNA、BDNFmRNA表达均明显增加(P<0.05~0.01)bcl-2蛋白表达虽增加,但无统计学意义(P>0.05)。减压联合益气化瘀补肾方与单纯减压相比,有一定的积极作用(P<0.05~0.01)。轻度组疗效优于中度组,中度组疗效优于重度组(P<0.05~0.01)。 结论:脊髓慢性损伤后以局部神经元的坏死和凋亡为主,同时可见脊髓组织炎症反应和神经营养因子表达增强,益气化瘀补肾方能够减轻脊髓慢性压迫后的功能损害,其机制可能是通过抑制脊髓组织中细胞的凋亡、抑制炎症反应、促进神经营养因子NGF和BDNF的表达而实现。减压是防治脊髓损伤进一步发展的有效措施,减压联合益气化瘀补肾方对提高疗效有一定的积极作用。
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