重金属离子的免疫测定方法是一个有挑战性并且有趣的研究领域,它集合了化学,生物学,免疫学等多个学科。与传统的仪器分析相比,这个方法具有灵敏,低成本,快速,高通量等优点,可以现场检测环境中重金属离子的残留。重金属离子免疫测定方法的研究包括以下步骤:半抗原的设计与合成,全抗原的合成,动物免疫,ELISA分析,检测方法的优化等。其中,半抗原的设计是重金属离子的免疫测定研究关键的一步,这篇论文的最大创新点就在于合成了两种全新的重金属离子的半抗原。青霉烯酸硫醇汞盐(MMPA),是青霉素的一种稳定的衍生物。硫醇汞盐法被广泛应用于青霉素含量的定量分析。在这篇论文中,青霉烯酸硫醇汞盐被创新性的用作汞离子半抗原,经过与蛋白质牛血清白蛋白偶联后,形成一种新的汞离子全抗原。该抗原被应用于多克隆抗体的制备,我们对抗体做了系统地ELISA分析。实验结果表明:1.合成的全抗原对动物是安全的,没有发现动物的中毒现象。2.免疫全抗原可以刺激动物的免疫系统产生高亲和性的抗体。抗原具有很高的免疫原性,经过4次加强免疫后,动物血清中抗体的效价超过83000。3.抗体与包被抗原OVA-GSH-HgCl反应所得OD值大于OVA-GSH,表明血清中含有针对汞离子特异的抗体。另外,半抗原及全抗原的合成步骤非常简单,易于表征。该全抗原可以应用于汞离子单克隆抗体的制备,有很大的市场潜力。同时,我们也合成了一种全新的铜离子的半抗原——青霉烯酸硫醇铜盐。我们改进了半抗原的合成方法,用咪唑作为催化剂,使用青霉素与氯化铜反应生成青霉烯酸硫醇铜盐,并用之与BSA偶联生成了铜离子的全抗原。我们用此全抗原免疫兔子,对免疫血清做了系统地ELISA分析。结果表明,铜离子的全抗原符合一个好的重金属离子全抗原的所有标准。目前,两种重金属离子的单克隆抗体正在制备中。