稻曲菌素(Ustiloxins)是稻曲病菌产生的一种环肽类次生代谢产物,具有抑制细胞有丝分裂的毒理活性,对动植物产生严重的毒害作用。迄今为止,从稻曲病菌中分离并鉴定了7种稻曲菌素,分别为稻曲菌素A、B、C、D、E、F、G,其中稻曲菌素A(Ust A)为主要成分。鉴于Ust A污染的普遍性和危害性,针对它的污染风险评估、毒理研究以及控制方法开发等受到业界的广泛关注。至今尚无可行的Ust A的全合成工艺,Ust A的来源严重受限,阻碍了对Ust A的深入研究。本研究以染病稻穗上的稻曲球为原料,开发了基于大孔吸附树脂联用高速逆流色谱大量制备Ust A的工艺;并对提取的Ust A的生物活性进行了测定,主要结果如下:(1)优化了稻曲球中Ust A的提取条件,最佳提取条件为:提取液为5%的甲酸水溶液、25℃、料液比为1:20。(2)优化了Ust A的分离方法。本研究首先比较了5种大孔吸附树脂对Ust A的分离效果,发现大孔树脂XAD-4具有较好的吸附效果。在样品液pH 7.0,吸附7 h,40%甲醇溶液(含0.1%三氟乙酸)洗脱条件下,可使大孔吸附树脂XAD-4的分离效果最佳,分离量达到296.29μg/g。(3)对比了制备液相色谱(Prep-HPLC)和高速逆流色谱(HSCCC)这两种方法对Ust A纯化的效果。结果显示制备色谱的对Ust A回收率为76.2%,获得的Ust A的纯度为80%,经过核磁和质谱检测证实纯化物为Ust A。在以正丁醇/5%TFA水溶液(1:1)作为双相体系,流速1 mL/min,转速1000 r/min,柱温30℃的条件下,高速逆流色谱对Ust A的回收率可达88%,纯度可达95%。同时,与制备液相相比,高速逆流色谱一次上样量大,每次可以制备200 mg以上的Ust A纯品。因此,高速逆流色谱为Ust A最佳纯化方法。(4)对制备的Ust A纯品的生物活性进行了检测,结果显示Ust A能够明显抑制小麦和水稻种子发芽,说明本研究提取的Ust A生物活性强,本研究优化所得的Ust A制备技术可用于Ust A的大量制备,获得Ust A纯品可用于对Ust A的进一步研究。