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用纯化的Asial型口蹄疫病毒免疫Balb/c小鼠，取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合，经间接ELISA和间接免疫荧光(IFA)免疫检测方法筛选，有限稀释法克隆，获得了6株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为1B4、1F5、3D9、3E11、3H6和5G3。间接ELISA测定，6株杂交瘤细胞培养上清效价分别为1：1024、1：256、1：256、1：256、1：64和1：128，小鼠腹水效价分别为5×10<-4>、1×10<-4>、1×10<-4>、1×10<-4>、1×10<-4>和8×10<-3>：ELISA和IFA结果显示，单抗1B4、1F5、3E11、3H6 和5G3仅与Asial型FMDV毒株反应，不与O型FMDV毒株反应，为抗Asial型FMDV的型特异性单克隆抗体；3D9既与Asial型FMDV毒株反应，又与O型FMDV毒株反应：表明它为针对两种血清型FMDV的共享表位单抗。Western blot分析表明，这6株单克隆抗体均不与全病毒抗原反应，表明它们所针对的抗原表位均为构象表位。相加ELISA试验表明，6株单抗分别识别不同的抗原表位。运用胰酶处理的Asial型FMDV抗原进行间接ELISA，结果显示各株单抗识别的抗原表位均为胰酶敏感性表位。经硫氰酸盐洗脱法测定，1B4、1F5、3D9、3E11、3H6和5G3的相对亲和力指数分别为1.5mol/L、2.5mol/L、3.5mol/L、2.5mol/L、1.0mol/L、和1.5mol/L。
用亲和层析纯化的牛抗Asial型FMDV阳性血清和1B4型特异性单抗，分别作为包被抗体和检测抗体，初步建立了快速检测Asial型FMDV的抗原捕获ELISA方法，并对试验条件进行了优化。确定的包被抗体的最佳包被浓度为7.375μg/mL，检测抗体的最佳使用浓度为0.625μg/mL。敏感性试验表明，该方法对Asial型FMDV提纯抗原的最小检出量为109ng/100μL，对细胞毒的最低检出量为10<3>TCID<,50>。特异性试验表明，本方法检测O型FMDV、牛结核病、牛肺疫、牛流行热、赤羽病、牛粘膜病等病原均不发生交叉反应，具有良好的特异性。
本研究成功制各了6株针对Asial型FMDV的单抗，在对这些单抗进行免疫学鉴定和生物学定性的基础上，初步建立了FMDV抗原捕获ELISA方法。这些研究结果，为用ELISA方法诊断FMD以及FMDV抗原表位结构与功能的研究建立了基础。