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背景:肝移植术后只有几种常规指标用于监测肝功能。这些指标不能充分反映移植肝功能。检测胆汁中胆汁酸来识别早期移植肝功能不良的方法被临床医师重视。因此,我们有必要进一步讨论肝移植术后胆汁中胆汁酸检测的意义。
(一)肝移植患者胆汁中胆汁酸RP-HPLC分析方法的建立
目的:建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定肝移植患者胆汁中胆汁酸的方法。
方法:色谱条件:色谱柱KromasilC18(250mm×Φ4.6mm,5μm),流动相为甲醇—-0.05mol/l磷酸盐缓冲液(77:23,V/V),pH值3.0,流速1.0ml/min,检测波长210nm。用反相高效液相色谱法测定肝移植病人术后胆汁酸中的七种结合型胆汁酸,并评价该方法的精密度、准确度、灵敏度及线性范围。
结果:RP-HPLC测定胆汁酸各组分最低检测限5μg/ml,在浓度为10~300μg/ml内,日内标准偏差小于5%,日间标准偏差小于10%,各胆汁酸的回收率为98%~103%。
结论:本文建立了胆汁中7种结合型胆汁酸测定的RP-HPLC分析法,该方法选择性强、灵敏度高、重复性好、测定时间短。
(二)肝移植术后早期胆汁中胆汁酸检测及其意义
目的:监测原位全肝移植术后早期胆汁中胆汁酸的代谢变化,探讨胆汁酸检测的临床意义,评价胆汁酸反映移植肝功能的有效性。
方法:分析天津市第一中心医院2005年6月至7月50例肝移植资料。肝移植术后2-7天TBIL≥10mg/dl或PT≥16秒持续3天以上作为初始功能不良组,TBIL≥10mg/dl或PT≥16秒持续1-2天作为初始功能中等组,TBIL<10mg/dl且PT<16秒作为初始功能良好组。分析三组术后2周内胆汁流、胆盐输出率、胆盐输出量、显性利胆活性、胆盐非依赖性胆汁流等变化。
结果:
1.肝移植术后即刻胆汁分泌量低,以后逐渐增加。术后2周内三组平均胆汁量:良好组348±152ml/day、中等组314±156ml/day、不良组237±145ml/day,三组间差异明显(P<0.05)。
2.随着肝功能的恢复,胆盐输出量也逐渐增加。术后2周内三组日平均胆盐输出量:良好组4.3146±2.3881mmol、中等组3.2889±2.1507mmol、不良组2.2258±1.8735mmol,三组间差异明显(P<0.05)。术后第2天,胆盐输出量在良好组为1.0676±0.5971mmol、中等组为0.5937±0.1932mmol、不良组为0.5942±0.5246mmol。术后第14天,良好组胆盐输出量为7.1150±1.1307mmol、中等组为6.1702±0.9333mmol、不良组为2.2711±1.7777mmol,三组胆盐输出量分别较其术后第2天增加了6.7倍、10.4倍和3.8倍。
3.术后2周内三组平均胆汁酸浓度,良好组为12025±3266μmol/l,中等组为10146±3324μmol/,不良组为9050±4077μmol/l,三组间有显著统计学差异。胆汁酸浓度,良好组在术后4天达到12000μmol/l,而中等组在术后10天达到此浓度,不良组术后2周内均低于10000μmol/l。
4.术后2周内三组患者显性利胆活性(ACA)和胆盐非依赖性胆汁流(BSIF)的差异:良好组ACA平均值为62.03±11.71μl/μmol,BSIF平均值为64.08±42.75μl/min;中等组ACA平均值为73.25±22.39μl/μmol,BSIF平均值为62.35±47.58μl/min;不良组ACA平均值为110.73±58.34μl/μmol,BSIF平均值为41.07±43.64μl/min。良好组和中等组ACA和BSIF基本相似,无显著统计学差异;良好组、中等组ACA均较不良组ACA明显低下,有显著统计学差异;BSIF在不良组虽较良好组和中等组低,但无统计学差异。
5.胆汁酸组分分析,肝移植术后胆汁中胆汁酸以初级胆汁酸为主,几乎全部为结合型胆汁酸。胆汁酸结合体主要为甘氨型。三组胆汁酸组分变化,未见显著统计学差异。
结论:胆汁中胆汁酸检测是一种无创、快捷的检查方法。肝移植术后胆汁中胆汁酸的代谢监测能反映移植肝功能变化规律。胆汁中胆汁酸监测可以评价移植肝功能。