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目的:检测在脑缺血/再灌注后表达细胞型朊蛋白(PrP~C)的脾脏CD4~+T细胞比例变化情况,并探究PrP~C对脑缺血再灌注后外周CD4~+T淋巴细胞亚群分化是否起作用及对神经元存活的影响。方法:1)选用野生型(WT)FVB/N雄性小鼠,应用线栓法建立一侧大脑中动脉栓塞(MCAO)模型;提取小鼠脾脏淋巴细胞,利用流式细胞技术检测细胞中CD4~+T细胞表面PrP~C表达含量;2)选用PRNP基因敲除、野生型、PRNP基因过表达小鼠,建立MCAO模型,流式细胞术检测脾脏CD4~+T细胞Th1/2/17亚群比例变化,并检测细胞上清及外周血相关细胞因子含量变化;3)将MCAO模型小鼠的脾脏淋巴细胞与糖氧剥夺/复糖复氧的HT22小鼠海马神经元细胞系共培养,利用Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡情况。结果:1)与假手术组小鼠相比,MCAO小鼠在缺血后上述时间时Longa评分升高,TTC染色提示模型建立成功,脾脏CD4~+T细胞表面PrP~C增高;2)PRNP K.O.小鼠的Longa评分较FVB/N小鼠显著升高(p<0.05),梗死区体积未表现出显著差异(p>0.05);Tga20小鼠Longa评分较FVB/N小鼠显著降低(p<0.05),梗死区体积显著降低(p<0.05);3)各基因型小鼠脾脏CD4~+T淋巴细胞Th1/2/17亚群表达均有显著增加(p<0.05),其中PRNP K.O.组小鼠较WT小鼠相比,Th1、Th17比例显著增加(p<0.05);Tga20组小鼠Th1明显下降,Th2明显增加,具有统计学意义(p<0.05);4)WT小鼠脾脏淋巴细胞上清中IL-10、IL-2、IL-6、IL-4、IFN-γ水平分别明显高于假手术组(p<0.05)。与WT小鼠相比,PRNP K.O.组小鼠脾脏淋巴细胞上清中IL-10、IL-2、IL-6、IL-17A、IFN-γ显著上升,具有统计学差异(p<0.05);IL-4显著下降,具有统计学差异(p<0.05);Tga20小鼠脾脏淋巴细胞上清中IL-10、IL-2、IL-4、IFN-γ明显上升,具有统计学意义(p<0.05),IL-17A显著下降,具有统计学意义(p<0.05);5)WT小鼠外周血中IL-10、IL-2、IL-6、IL-4、TNF、IFN-γ水平分别明显高于假手术组(IFN-γ及IL-2 p<0.05,其余p<0.01)。与WT小鼠相比,PRNP K.O.小鼠IL-2、IL-6、IL-17A、TNF显著上升,具有统计学差异(IL-6、TNF p<0.05,IL-2 p<0.01,IFN-γp<0.001)。Tga20小鼠外周血IL-10、IL-2、IL-4明显上升,具有统计学意义(IL-4p<0.05,其余p<0.01)。结论:1)PrP~C在缺血再灌注后外周CD4~+T细胞中表达升高,提示其参与到缺血性脑损伤的外周免疫反应当中。2)PrP~C影响缺血性脑卒中后症状严重程度及梗死体积;参与脑缺血损伤后外周T细胞免疫炎症反应,PrP~C缺失导致Th细胞向促炎亚群方向分化,相关促炎性细胞因子表达上升;PrP~C过表达导致Th细胞向抗炎亚群方向分化,相关抗炎性细胞因子表达增加。