结血篙系菊科篙属植物，具有清热、消炎、祛风、利湿之功效，是一种传统的藏药，广泛应用于多种炎症相关疾病的治疗，但是至今对它的抗炎药理作用及机制仍知之甚少。本研究目的是为了考察药物的抗炎分子机理，基本思路是在炎症病理的基础上研究药物的抗炎药理作用。简而言之，利用一个合适的动物模型，在整体水平上考察药物对发病机理的药理学上的干预，然后深入到细胞和分子水平，从而找到药物调控机理的线索。本研究通过半抗原诱导的接触性皮炎和LPS诱导的败血症这两种炎症疾病模型探讨了结血蒿及其成分发挥其抗炎作用的可能机制。 ⑴选择了接触性皮炎作为研究的动物模型，因为我们在药物研究早期发现结血蒿在T细胞上的作用，同时接触性皮炎又是一种T细胞调节的免疫炎症性疾病，该药物在此模型上有显著的治疗作用。结合接触性皮炎的临床机理，我们发现了结血蒿治疗作用的特点，如在诱导相给药有效。结合理论和实验，我们排出了一些可能性，最后强调药物对增殖和活化的作用。结果发现，粗提物和一些单体(J—02，J—03)在体外抑制Con A诱导的淋巴细胞的增殖，同时还抑制相关的炎症因子INF—α的产生。CD25，是IL-2的细胞表面受体分子，我们采用了FACS的方法来研究药物是否下调这种分子的表达。当淋巴细胞活化后，CD69阳性细胞的比例增加，而药物处理后，阳性细胞的比例明显下降。环加氧酶Cyclooxygenase-2(COX-2)，是催化花生四烯酸转变为前列腺素和血栓素的限速酶，与机体的各种炎症生理病理过程密切相关，经研究分析，结血蒿提取物及(J—02，J—03)均可抑制COX-2的活性。 ⑵选择了败血症模型(身体某些部位细菌感染及其随后产生的一系列全身系统性的炎症反应)进一步来考察结血蒿粗提物的抗炎作用机理。我们主要研究了药物对脂多糖(LPS)诱导的败血症模型的抗炎活性和作用机理。脂多糖为格兰氏阴性菌的细胞壁，是最常见的用来研究巨噬细胞活性的细菌刺激物。在血液中，LPS与LPS结合蛋白(LPS binding protein)结合后，再与巨噬细胞表面的活化丛结合。之后激活巨噬细胞分泌大量炎症因子，如肿瘤坏死因子(TNF—α)。预先体内给药可以明显的降低血清内TNF—α的产生，以及肝和肺组织TNF—α的表达，同时提高实验性小鼠败血症模型的存活率。 ⑶为了进一步研究结血蒿提取物的抗炎作用，我们同时在鼠源巨噬细胞株RAW 264.7上考察了药物的作用。结果发现，结血蒿提取物在体外明显抑制LPS诱导的巨噬细胞炎症因子TNF—α，interleukin-1β及cyclooxygenase-2的表达。此外，提取物剂量依赖性地抑制有丝分裂原激活蛋白酶(MAPKs)如p38，extracellular signal-regulated kinase(ERK 1/2)和c—Jun NH2-terminal kinase(JNK)的激活。同时，药物预处理可以抑制nuclear factor—κB(NF—κB)的激活，及抑制蛋白κB(IκB)的磷酸化和降解。这些结果表明，结血蒿提取物抑制巨噬细胞炎症因子的释放是通过抑制MAPKs和NF—κB两条信号通路。综上所述，J—02和J—03可能是结血蒿抑制接触性皮炎的有效成分。本实验还阐述了结血蒿的其它抗炎效果，即对LPS诱导的败血症的有效作用。