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目的：卵巢癌是妇科肿瘤中致死率最高的肿瘤，发病率居妇科恶性肿瘤的第3位，但其病死率却居首位，严重威胁妇女的健康。虽然手术和传统化疗、放疗技术均有所改进，但晚期卵巢癌患者5年生存率仍不超30%。目前肿瘤细胞减灭术、紫杉醇联合卡铂化疗是标准的治疗方案。但肿瘤细胞对化疗药物产生耐药是晚期卵巢癌患者治疗失败和死亡的主要原因。因此，研究卵巢癌耐药机制，寻找逆转卵巢癌的途径是提高卵巢癌生存率的关键。近年来各项研究表明，DNA损伤修复能力增强、细胞内化疗药物浓度降低、药物作用靶点异常以及细胞内信号转导通路异常等都可以导致卵巢癌细胞产生耐药[1]。近年来，对细胞内信号转导通路异常及DNA损伤修复能力增强引起的化疗耐药逐渐成为热点。研究发现，格尔德霉素是苯安莎类抗生素类药物，属于Hsp90抑制剂。我们前期的研究显示，格尔德霉素可以通过下调对顺铂耐药的卵巢癌细胞SKOV3/DDP细胞中的耐药基因LRP、GST-π而改善卵巢癌细胞对顺铂的耐药性，但是临床前研究发现格尔德霉素有较高的肝脏毒性而限制了其临床的推广使用。国外有研究表明[1]，格尔德霉素衍生物17-烯丙基氨基-17-去甲氧基格尔德霉素（17-AAG）可以逆转多种癌症的耐药及阻断癌症耐药的细胞内的信号转导通路，且具有较低的肝毒性，在乳腺癌及肺癌的研究及应用中较多，在卵巢癌中的应用尚无研究。本研究旨在探讨17-AAG与顺铂联合应用对人卵巢癌细胞SKOV3和对顺铂耐药的卵巢癌细胞SKOV3/DDP耐药性的影响及其机制，探究引发卵巢癌化疗耐药的机制，并为改善卵巢癌的化疗耐药提供理论依据。方法：1MTT检测不同浓度顺铂（2,4,8,16,32μg/ml）格尔德霉素衍生物17-AAG(1.2,2.4,4.8,9.6,19.2μg/ml对人卵巢癌细胞SKOV3及对顺铂耐药细胞SKOV3/DDP的增殖抑制的影响，17-AAG和顺铂联合应用（1.2μg/ml17-AAG+2μg/ml顺铂，2.4μg/ml17-AAG+2μg/ml顺铂，4.8μg/ml17-AAG+2μg/ml顺铂,9.6μg/ml17-AAG+2μg/ml顺铂，19.2μg/ml17-AAG+2μg/ml顺铂）对人卵巢癌细胞SKOV3细胞及17-AAG和顺铂联合应用（1.2μg/ml17-AAG+3μg/ml顺铂，2.4μg/ml17-AAG+3μg/ml顺铂，4.8μg/ml17-AAG+3μg/ml顺铂,9.6μg/ml17-AAG+3μg/ml顺铂，19.2μg/ml17-AAG+3μg/ml顺铂）对顺铂耐药细胞SKOV3/DDP细胞增殖抑制的影响。2流式细胞术检测格尔德霉素衍生物17-AAG、顺铂、17-AAG联合顺铂处理SKOV3、SKOV3/DDP细胞前、后细胞周期的改变及凋亡率的影响。3RT-PCR的方法检测格尔德霉素衍生物17-AAG、顺铂、17-AAG联合顺铂处理SKOV3、SKOV3/DDP细胞前、后DNA修复基因ERCC1、XRCC1及抑癌基因BRCA1、BRCA2基因mRNA的表达变化情况。4所有数据使用SPSS13.0软件统计分析。实验结果用x±s表示，两组间均数比较用t检验，多组间均数比较采用单因素方差分析，P<0.05为差异具有统计学意义。结果：1格尔德霉素衍生物17-AAG（1.2、2.4、4.8、9.6、19.2μg/ml）对SKOV3/DDP细胞具有显著的增殖抑制作用，对SKOV3也有增殖抑制作用，但较SKOV3/DDP的增殖抑制作用弱;随着17-AAG浓度的增加，其对SKOV3和SKOV3/DDP的增殖抑制作用逐渐增强，呈剂量依赖性。不同浓度顺铂（2，4，8,16,32μg/ml）分别处理SKOV3和SKOV3/DDP细胞48h后，对两种卵巢癌细胞均有明显增殖抑制作用，呈一定的时间剂量依赖关系，而且顺铂对SKOV3细胞的抑制作用较SKOV3/DDP明显。17-AAG联合顺铂对SKOV3和SKOV3/DDP细胞均有明显的增殖抑制作用，但对SKOV3/DDP细胞的增殖抑制作用较强，两药联合应用对SKOV3和SKOV3/DDP细胞的增殖抑制作用均高于17-AAG和顺铂的单独应用对SKOV3和SKOV3/DDP细胞的作用。2流式细胞学检测顺铂、17-AAG、17-AAG联合顺铂对SKOV3、SKOV3/DDP细胞的细胞中周期阻滞及凋亡率。(1)在SKOV3细胞中，顺铂、17-AAG、17-AAG联合顺铂处于DNA前期G0/G1期的细胞所占的比例分别为：53.90%±7.23%，52.23%±1.10%，37.07%±0.40%，处于G2/M期的细胞所占的比例：7.53%±0.63%，31.80%±2.20，6.4%±0.53%，S期细胞的比例：38.59%±1.01%，15.99%±0.82%，56.53%±0.48%；在SKOV3/DDP细胞中，顺铂、17-AAG、17-AAG联合顺铂处于DNA前期G0/G1期的细胞所占的比例分别为：45.37%±6.24%，53.60%±9.77%，48.50%±8.3%，处于G2/M期的细胞的比例：33.27%±3.83%，24.83%±2.72%，23.69%±0.72%；S期细胞的比例：21.35%±0.17%，14.33%±0.42%，23.03%±0.004%。经统计学分析，我们研究结果显示顺铂、17-AAG、17-AAG联合顺铂三种处理方式对SKOV3、SKOV3/DDP细胞的细胞周期的分布无明显影响。(2)SKOV3细胞中各组的凋亡率分别为10.54%±2.19%，3.34%±0.90%，15.65%±0.96%； SKOV3/DDP细胞各组的凋亡率为7.61%±1.50%，20.38%±6.50%，29.22%±2.74%。在SKOV3、SKOV3/DDP细胞中都以17-AAG联合顺铂组的凋亡率最高，差异性有显著性（P<0.05）；由此可见，17-AAG和17-AAG联合顺铂有促进卵巢癌细胞SKOV3、SKOV3/DDP凋亡的作用，对细胞周期无明显影响，其中以17-AAG联合顺铂对SKOV3、SKOV3/DDP细胞的凋亡抑制作用更明显（P<0.05）。3RT-PCR法检测SKOV3和SKOV3/DDP细胞经顺铂、17-AAG及17-AAG联合顺铂处理后DNA损伤修复基因ERCC1、XRCC1和抑癌基因BRCA1、BRCA2的表达情况，结果显示：（1）17-AAG及17-AAG联合顺铂作用于SKOV3/DDP细胞48h后，DNA修复基因ERCC1、XRCC1mRNA表达均比空白对照组及顺铂组明显下降（P<0.05），顺铂组与空白对照组比较DNA损伤修复基因ERCC1、XRCC的表达无明显改变。相反，抑癌基因BRCA1、BRCA2表达在17-AAG及17-AAG联合顺铂组明显增高，与空白对照组相比有显著性差异（P<0.05）。17-AAG联合顺铂可下调SKOV3/DDP细胞ERCC1、XRCC1mRNA两种DNA修复基因的表达，上调抑癌基因BRCA1、BRCA2mRNA的的表达，17-AAG联合顺铂对SKOV3和SKOV3/DDP细胞的ERCC1、XRCC和BRCA1、BRCA2的调节作用较单药17-AAG和顺铂组明显。（2）顺铂、17-AAG、17-AAG联合顺铂处理SKOV3细胞处理48h后，在顺铂组，ERCC1、XRCC1、BRCA1、BRCA2mRNA的表达比空白对照组明显上升，有显著性差异（P<0.05），17-AAG组及17-AAG联合顺铂组的ERCC1、XRCC1mRNA表达比顺铂组下降，BRCA1、BRCA2表达比顺铂组上升。结论：117-AAG联合顺铂对SKOV3和SKOV3/DDP细胞有明显的增殖抑制作用，两药联合应用对SKOV3和SKOV3/DDP细胞的增殖抑制作用均明显强于17-AAG和顺铂单独应用对SKOV3和SKOV3/DDP细胞的增殖抑制作用。217-AAG联合顺铂对SKOV3/DDP和SKOV3细胞均有明显的诱导细胞凋亡作用，可使细胞凋亡率明显增加。两药联合应用对SKOV3/DDP和SKOV3细胞的诱导凋亡的作用均明显强于17-AAG和顺铂单独使用。顺铂、17-AAG、17-AAG联合顺铂对SKOV3、SKOV3/DDP细胞的细胞周期无影响。317-AAG可以增强卵巢癌细胞对顺铂的敏感性，在一定程度上逆转卵巢癌细胞对顺铂的耐药性，其改善顺铂耐药的机制可能与抑癌基因BRCA1、BRCA2的表达上调及DNA修复基因XRCC1、ERCC1下调相关。