转录因子GRHL3在人喉癌的生物学行为及临床意义的研究

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目的喉鳞状细胞癌是耳鼻喉科常见的恶性肿瘤,在咽喉头颈部肿瘤的诊疗中占据非常重要的地位,随着环境的污染加重和人们生活习惯的改变,近几年发病呈上升趋势。其以恶性程度高,发病症状不明显,早期易发生颈部淋巴结转移,复发率高,术后严重影响患者生活质量为特征一直是临床医生面临的挑战。在基因生物分子方面寻找喉癌的潜在诊疗靶点是近几年的研究热点,GRHL3作为转录因子在多种癌症和正常人体组织发育中扮演重要角色,而且目前在喉癌领域研究并不多。本文旨在采取对喉癌术后组织蜡块采取免疫组化染色,人喉癌细胞系采用RT-qPCR,western blot,细胞转染技术以及功能实验探讨GRHL3在喉癌中的表达及其生物学行为,以期为喉癌GRHL3的研究提供一定的思路和基础。方法通过对喉癌患者术后病理蜡块及癌旁正常组织进行常规病理检查及免疫组化染色,人喉癌细胞系采用RT-qPCR,western blot,探讨GRHL3在喉癌组织及喉癌细胞中的表达情况。同时采用细胞转染技术,transwell实验和CCK-8实验证实沉默GRHL3的表达可降低喉癌细胞的迁移、侵袭和增殖能力,以及可影响肿瘤细胞形成上皮-间质化转变EMT(epithelia-mesencheymal transition)相关基因的表达,并且探讨其是否与激活调控Wnt/β-catenin信号通路相关。结果1.40例喉鳞癌患者术后肿瘤组织及癌旁正常组织蜡块行免疫组化显示:喉鳞癌组织中GRHL3表达明显高于癌旁正常组织,统计分析与临床分期,淋巴结转移,组织学分级密切相关(p<0.05)。2.采用细胞瞬时转染技术沉默GRHL3的表达,可以降低人喉癌细胞侵袭,迁移和增殖能力。3.沉默GRHL3表达可以使人喉癌细胞形成EMT中重要标志物基因E-cadherin上调和Vimentin降低,另外下调Wnt/β-catenin信号通路中基因β-catenin和cyclinD1的表达。结论1.GRHL3的表达与喉鳞癌患者临床和病理参数密切相关。2.沉默GRHL3可降低人喉癌细胞的侵袭、迁移和增殖能力。3.喉癌的迁移侵袭发生肿瘤EMT与GRHL3相关,可能受Wnt/β-catenin信号通路调控。
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