论文部分内容阅读
本论文通过两个试验，采用高效液相色谱(high performance liquid chromatogram，HPLC)技术研究建了饲料中卡那霉素A和新霉素的检测方法。(1) 采用HPLC技术建立了饲料中卡那霉素A的检测方法。用0.1 mol/L的盐酸溶液提取饲料中的卡那霉素A，提取液以20000rpm的转速高速离心，上清液经复合阳离子(mixed mode cation exchanger，MCX)固相萃取(solid phase extraction，SPE)小柱净化，然后用5％氨水-甲醇溶液洗脱。洗脱液采用氮气吹干，用硼酸缓冲液溶解与邻苯二甲醛(o-phthaladehyde，OPA)衍生液在室温下反应10 min，在反相XTerraC<,18>柱分离。流动相为醋酸铵缓冲液和乙腈(1:1，v/v)，等度洗脱，检测器选用荧光检测器，激发波长为230nm，发射波长为389nn，运行时间为20min。结果表明，以0.1 mol/L盐酸溶液为提取液，经SPEd小柱净化，卡那霉素A的分离效果较好，且没有其它杂质峰干扰。饲料中添加10～200 mg/kg卡那霉素A的平均回收率为98.4～106.0％，变异范围为1.17～9.78％，线性范围为0.1～10μg/mL，卡那霉素A在饲料中的检出限为5mg/kg，定量限为10 mg/kg。(2)利用HPLC和SPE技术建立了饲料中新霉素的检测方法。用0.1 mol/L的盐酸溶液提取饲料中的新霉素，提取液经20000 rpm离心后由SPE小柱净化，用25％氨水-甲醇溶液洗脱，洗脱液用氮气吹干，然后用硼酸缓冲液溶解与9-芴基甲氧碳酰氯(9-fluorenylmethoxycarbonyl chloride，FMOC-Cl)衍生剂在室温下反应15 min，在反相xTerra C<,18>柱分离。流动相为水和乙腈，洗脱程序为梯度洗脱。检测器为荧光检测器，激发波长为267 nm，发射波长为309 nm，运行时间为30 min。经过色谱条件的优化和前处理条件的选择，饲料中新霉素的分离效果较好，灵敏度较高。饲料中添加80和100 mg/kg新霉素的平均回收率为82.1～92.6％，变异范围为5.24～9.21％。新霉素的线性范围为0.05～1.0μg/mL，检出限为0.5 mg/kg，定量限为1 mg/kg。