目的:探究五味子醇乙(Schisandrol B,Sch-B)联合蟛蜞菊内酯(Wedelolactone,Wed)对胆管结扎与四氯化碳所致小鼠肝纤维化的保护效应与其作用机制。方法:1.利用胆管结扎(bile duct ligation,BDL)手术诱导建立小鼠胆汁淤积型肝纤维化模型。C57BL/6小鼠被随机分为假手术组(control)、胆管结扎模型组(BDL-Model)、秋水仙碱阳性药组(colchicine 0.2mg/kg)、Wed20mg/kg组、Sch-B40mg/kg组、Wed20mg/kg+Sch-B40mg/kg组。假手术组打开腹腔,剥离总胆管,但不实施胆管结扎,其余四组,剥离总胆管后实施结扎。术后第7d开始给药,连续给药14d。比色法检测血清中羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)的含量;采用HE染色、马松(Masson)染色与天狼星红染色法(sirius red staining)观察肝脏的组织病理学变化;免疫组化染色法检测肝脏组织α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)的表达;实时定量PCR法(Real-time Quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)检测肝脏组织中的促纤维化生长因子与肝星形细胞增殖趋化因子m RNA的表达;Western blot法(免疫蛋白印迹法)检测肝脏组织中TGF-β/Smad信号通路与NF-κB信号通路相关蛋白的表达。2.利用CCL4诱导小鼠化学性肝损伤肝纤维化模型。C57BL/6小鼠被随机分为橄榄油溶剂对照组(control)、CCL4模型组、秋水仙碱阳性药组(colchicine0.2mg/kg)、Wed20mg/kg组、Sch-B40mg/kg组、Wed20mg/kg+Sch-B40mg/kg组。将CCL4溶于橄榄油中制备成5%的CCL4油溶液,腹腔注射2m L/kg。每日1次,14d后开始给予治疗药物。治疗28d后,留取血液与组织样本。检测指标同上。3.体外建立炎症刺激模型以及纤维化模型,探讨Wed与Sch-B抗肝纤维化的作用机制。结果:1.与模型组相比,Wed与Sch-B单独给药组与联合给药组均具有明显的保肝效应,并且还可以降低血清中Hyp含量,联合给药组效果最佳,且有显著性差异。2.HE染色、Masson染色、天狼星红染色显示,与模型组相比,WED与Sch-B单独给药组均能够减少小鼠肝脏组织中小胆管增生,降低炎性细胞浸润与纤维间隔的生成,联合给药组效果最佳,且有显著性差异。3.WED与Sch-B单独给药组与联合给药组均可以抑制肝星形细胞的增殖。与模型组相比,WED与Sch-B单独给药组与联合给药组均可降低肝脏组织中Collagen 1蛋白的表达,以联合给药组效果最佳,且有显著性差异。4.WED与Sch-B单独给药组可抑制TGF-β/Smad信号通路的转录。与模型组相比,WED与Sch-B单独给药组与联合给药组均可下调Smad2/3的蛋白表达,联合给药组效果最佳,且有显著性差异。5.WED与Sch-B单独给药组与联合给药组与联合给药组都能够抑制NF-κB信号通路的转录。与模型组相比,WED与Sch-B单独给药组与联合给药组可减少P-IκBα蛋白表达水平以联合给药组效应最强,且有显著性差异。6.Wed主要通过在巨噬细胞中抑制NF-κB信号通路的激活与炎症的激活,在肝星形细胞中抑制TGF-β/smads信号通路逆转肝纤维化。Sch-B与Wed具有协同作用结论:Wed与Sch-B能够有效地阻断与抑制BDL与CCL4诱导的小鼠肝纤维化的形成,其机制可能与其抑制TGF-β/Smad与NF-κB信号转导通路转录有关。