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高速（效）逆流色谱(High-speedCounter-currentChromatography，HSCCCandHigh-performanceCounter-currentChromatography，HPCCC)和高效液相色谱(High-performanceLiquidChromatography，HPLC)技术是近三十年来发展较快的分离分析技术之一，主要应用于无机离子、有机分子、生物大分子和对映体等样品的分离分析，具有分离效率高、分析速度快、所需样品少等特点，在分析化学、药物化学、生物化学、分子生物学、食品化学、环境化学等许多领域得到了广泛的应用。
本论文围绕天然产物中有效成分的筛选制备和分离分析方法研究，以高速（效）逆流色谱和高效液相色谱的应用为研究目标，分别应用高效逆流色谱对油菜花粉中6种大极性物质成分进行了分离制备研究;应用高速逆流色谱对黄芪中具有扩血管作用的4种黄酮类活性物质成分进行了分离制备研究;应用高效液相色谱建立了黄芪指纹图谱，并测定了主要成分的含量。研究内容主要有以下三个方面:
1.首次建立了一种高速剪切技术和高效逆流色谱技术联用模式，通过系统的溶剂体系筛选和色谱条件的优化，发展了一种简捷快速的油菜花粉中尿嘌呤核苷、黄嘌呤核苷、鸟嘌呤核苷、腺嘌呤核苷、山奈酚．3，4-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷和山奈酚-3-O-(2-O-β-D-吡喃葡萄糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷6种大极性成分的在线提取、分离、纯化制备方法。应用该方法分离得到的6种化合物的纯度分别为95.3％,97.4％,97.1％,96.5％,98.8％和99.1％。
2.建立了一种活性筛选指导下的高速逆流色谱分离制备天然产物中活性成分的方法。应用动物实验对不同黄芪提取物进行药效活性筛选，确定了具有扩血管作用的活性部位;通过系统的溶剂体系筛选和色谱条件的优化，从活性部位中分离得到了4种具有潜在扩血管作用的黄酮类化合物，分别为毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷、芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素，纯度分别达到了95.9％，94.5％，97.1％和94.1％。
3.应用高效液相色谱法，通过系统的样品采集、前处理方法筛选和色谱条件优化以及严格的方法学考察，建立了我国黄芪主产区黄芪药材的色谱指纹图谱，并通过化学计量学计算，建立了黄芪药材判别函数。此方法不仅可以用于样品质量的评估，还可以通过函数的计算将未知产地的样品分组归类，大大降低了传统方法依靠经验猜测的不确定性，可以有效的辨别不同产地的黄芪样品，是一种实用的、可靠的质量控制方法。
本文的创新性研究工作主要体现在:1.建立了一种高速剪切技术和高效逆流色谱技术联用模式，可以简捷快速的从天然产物中提取、分离、纯化大极性物质成分。2.建立了一种动物药效活性筛选指导下，应用高速逆流色谱从天然产物中分离活性物质成分的方法。应用此方法可以有目的性的、快速的制备天然产物中具有药效活性的化学成分，为药物先导化合物的发现提供新的思路和方法。3.应用高效液相色谱法对我省定西地区大宗、道地名贵药材黄芪开展了色谱指纹图谱研究。并结合聚类分析、主成分分析和判别分析等化学计量学方法计算，不仅可以用于样品质量的评估，还可以通过函数的计算将未知产地的样品分组归类。应用此方法可以有效的辨别不同产地的黄芪样品，是一种实用的、可靠的质量控制方法。