诃子和虎杖有效抗菌组分的分离纯化及药效评价

来源 :集美大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangbenny918
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究在前期已有的研究基础上,筛选诃子(Terminalia Chebula Retz.)和虎杖(Rhizoma Polygoni Cuspidati)两种对水产致病菌具有较好抑菌作用的中药,采用超声波辅助提取法和高速逆流色谱法对其有效组分进行提取分离,以建立高效、快速、准确的分离方法。嗜水气单胞菌(B11)和维氏气单胞菌(B59)是气单胞菌中危害较大的两种菌,可引起多种水产动物发生疾病。本研究采用微量热法测定中药各分离组分对这两株菌的体外抑菌效果,初步探讨中药抗菌组分的最佳抑菌浓度。根据抑菌作用的结果,选择抑菌活性高的一个单体成分进行活体实验,以人工感染嗜水气单胞菌的斑马鱼作为疾病模型,从鱼体的非特异免疫指标水平和死亡率来探讨其药效。主要结果如下:1、采用超声波辅助提取法对中药诃子进行粗提,设计L9(34)正交试验,考察乙醇浓度、料液比、超声温度和超声时间四个因素,优化诃子鞣质类成分的超声提取工艺。最佳工艺条件为:乙醇浓度60%,料液比1:20,温度50℃,提取时间80 min,4个因素对诃子中没食子酸提取率影响的大小顺序为:A(乙醇浓度)>D(超声时间)>B(料液比)>C(超声温度)。在该条件下,诃子中没食子酸的提取量为10.80 mg/g。2、本研究对中药诃子的主要抗菌组分进行提取分离,分析型高速逆流色谱确定诃子醇提物的分离体系为:正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1:5:1:5,v/v),放大于制备型高速逆流色谱上进行分离制备,根据色谱峰,可分离得到4个组分(T1?T4)。微量热结果表明,4个分离组分对菌株B11和菌株B59均具有抑制作用,抑菌强弱依次为:T3>T2>T4>T1,其中组分T3对菌株B11和菌株B59的最佳抑菌浓度分别为0.56 mg/mL和0.74 mg/mL。经HPLC纯度分析,组分T3的纯度为96.4%,质谱鉴定为没食子酸。3、本研究对中药虎杖的主要抗菌组分进行提取分离,分析型高速逆流色谱确定虎杖醇提物的分离体系为:氯仿-甲醇-水(4:3.8:2,v/v),放大于制备型高速逆流色谱上进行分离制备,可获得5个组分(R1?R5)。微量热结果表明,组分R1和R5对两株试验菌株具有抑制作用,抑菌强弱为:R1>R5,其中组分R1对B11的最低抑菌浓度为1.58 mg/mL,对B59的最低抑菌浓度为1.14 mg/mL。经HPLC分析,组分R1含有两个成分,其中一个成分推测为大黄素。4、以斑马鱼为试验鱼,将没食子酸分别按质量为0.3%、0.6%、1.2%、2.4%的比例添加到基础饲料中,饲喂14 d,并测定总超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)的活性变化。结果表明没食子酸可以增强鱼体的非特异免疫性功能,0.6%组和1.2%组的4种酶活均在第10 d显著高于对照组。饲喂药饵14 d后,将斑马鱼人工感染嗜水气单胞菌,结果表明没食子酸添加组的斑马鱼死亡率与对照组相比有所降低,1.2%组和2.4%组的死亡率显著低于对照组,较对照组分别降低25%和20%。综上所述,超声波辅助萃取法适合诃子中没食子酸的提取,在优化的工艺条件下,没食子酸的提取量为10.80 mg/g。高速逆流色谱法对两种中药的主要抑菌成分进行分离,并结合微量热结果得知,诃子4个分离组分(T1?T4)对试验菌株均有抑制作用,其中T3(没食子酸)是诃子的主要有效抑菌成分;虎杖组分R1和R5对两株试验菌株具有抑制作用,其中,大黄素为组分R1中的一种成分。活体试验表明,没食子酸可以提高鱼体的非特异免疫力,从而增加其抗病力,对细菌性疾病具有一定的预防作用。
其他文献
为了实现鱼骨可溶性钙的高效提取,搭建了基于单相变压器结构的试验系统并设计制造了功能性的玻璃腔体,以低频硅钢(400~700 Hz)作为闭合磁路利用感应交变电场对青鱼鱼骨钙进行
随着热轧带钢生产技术的发展,市场对于带钢品质的要求与日俱增,热轧层流冷却作为带钢卷取前的最后一个环节,对于带钢温度的控制精度直接决定了带钢金相组织的好坏以及带钢品
本文将从明代沈周中年代表作《庐山高》与元代王蒙代表作《青卞隐居图》二张作品其及其相似的布局、表现手法、山石形态等几方面的密切、具体的关联入手,结合二人的时代背景,社会关系、流派、收藏及传承渊源等方面的关联,阐述绘画艺术处于特殊时期的明代,其政治、经济、文化对绘画的影响导致的明代广大画家卖画为生,院体画家以临摹代替创作,进而相摹相抄的大背景影响下王蒙对沈周最为直接的画风影响。如果以上论述的两张作品二
石墨烯材料具有高热导率、高透过率、高导电率以及良好的机械强度等性能,在柔性传感器、透明显示屏、射频天线等领域有广阔的应用前景。近年来,由于喷墨打印技术具有操作简单
航空液压导管的振动疲劳寿命关系到飞行器的安全,其振动疲劳寿命需要通过试验来验证.介绍了液压导管的振动疲劳试验方法,对施加在液压导管上的静应变和动应变做了详细的不确
细菌非编码小RNA(sRNA)在菌体的应激反应中起重要作用,但很少有研究探讨sRNA在乳酸乳球菌中的功能。本课题组之前的研究表明,在pH 5.0条件下将菌株应激之后,RNA深度测序和验
随着社会需求和技术的发展,煤矿井下变电站逐步向智能变电站发展。变电站内通信电源的设计和配置是智能变电站发展的根本。传统井下变电站站用通信电源单独设计,阻碍了其向智
近百年来,几代美术家为繁荣津沽的美术事业奉献着自己的聪明才智,他们以自己独具特色的创作,丰富着天津的美丽画卷.随着时间的流逝,一些艺术家已经离我们而去,在研究这一时期
当今世界经济的两个主要特征是经济全球化和经济信息化,中国经济需要与世界经济接轨,参与世界经济竞争,中国的经济结构和经济制度发生了很大的变化。国内外经济形势的变化和发展,直接或间接地涉及到会计领域,经济转型升级重在会计转型升级,财务会计转管理会计,财务部转财经团队。会计的职能由核算型向管理型、战略型转轨,财务共享服务成为了会计转型后未来的发展方向,财务的组织架构、信息系统、人才培养、团队建设等都发生
聚氯乙烯(PVC)是目前世界上五大通用树脂之一,因其性能优异,被广泛应用于建筑、电讯、化工、包装等各个领域。然而,生产PVC工艺方面的不足致使其自身带有缺陷结构,使得PVC热稳定性差,极易发生热降解。因此,加入热稳定剂来提高其稳定性能至关重要。本论文以围绕合成性能优异的PVC热稳定剂为中心而展开。首先,分别合成PVC辅助热稳定剂乙酰丙酮钡/锌以及主稳定剂氰尿酸钙/锌。其次,系统的探究其对PVC热稳