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目的建立适用于临床分析的尿修饰核苷多组分检测方法,探讨尿修饰核苷在乳腺癌中西医诊断、手术疗效判断中的临床价值。方法1.优化条件,完善流程,确立样本标准化分析程序,建立适用于临床分析的尿修饰核苷多组分分析方法。2.根据入组标准选取2016年9月至2017年7月于浙江省中医院就诊的患者和健康体检者,分别纳入乳腺癌组55例、乳腺良性疾病组55例、健康对照组54例。采用构建的检测平台对受试者的尿修饰核苷进行定量分析。根据受试者的情况(年龄、绝经状态、体重指数、肿瘤大小、病理类型、淋巴结转移情况、TNM分期、分子亚型、中医辨证分型、手术前后)进行统计分析,并与传统乳腺癌肿瘤标记物CA153比较,探讨尿修饰核苷与乳腺癌临床特征的关系。结果1.液相色谱-质谱(LC-MS)数据显示:6种修饰核苷(除Pseu,NNdmG)线性方程在1-800ng/mL范围内相关系数良好(R2>0.9942),NNdmG在20-3200ng/mL范围内相关系数良好(R2=0.9996),检出限均<1.0ng/mL;Pseu在1-20μg/mL范围内相关系数良好(R2=0.9972),检出限<10.0ng/mL。2.健康对照组年龄、绝经状态、体重指数对8种尿修饰核苷排放水平无影响(P>0.05);在已检测的8种尿修饰核苷中,乳腺癌组7种修饰核苷(5mU、Pseu、N4C、NNdmG、N2mG、1mG、3mU)水平显著高于非乳腺癌组(P<0.01),而1mA在三组间没有统计学差异(P>0.05);7种修饰核苷(5mU、Pseu、N4C、NNdmG、N2mG、1mG、3mU)诊断乳腺癌的阳性率均显著高于传统肿瘤标志物CA153(P<0.05);对7种尿修饰核苷(5mU、Pseu、N4C、NNdmG、N2mG、1mG、3mU)进行Logistic回归分析,发现N4C、NNdmG、1mG有统计学意义(P<0.05),建立联合诊断预测值回归方程:Y乳腺癌=3.557*1mG+2.979*N4C+2.043*NNdmG-12.269;以建立的联合诊断预测值与7种修饰核苷(5mU、Pseu、N4C、NNdmG、N2mG、1mG、3mU)分别绘制ROC 曲线,单项检测时NNdmG的诊断效能高于其余修饰核苷,AUC为0.933;而联合检测的诊断效能优于任一单项检测,AUC达到0.96,最佳诊断效能达到灵敏度96.4%,特异性为87.2%;7 种修饰核苷(5mU、Pseu、N4C、NNdmG、N2mG、1mG、3mU)与 TNM 肿瘤分期、肿瘤大小无相关性(P>0.05);在不同病理类型、分子亚型、中医辨证分型的乳腺癌患者中7种修饰核苷(5mU、Pseu、N4C、NNdmG、N2mG、1mG、3mU)水平无统计学差异(P>0.05);在有淋巴结转移的乳腺癌患者中7种修饰核苷(5mU、Pseu、N4C、NNdmG、N2mG、1mG、3mU)水平显著高于未发生淋巴结转移的患者(P<0.05);与术前一天检测结果相比,行乳腺癌根治术、乳腺癌改良根治术后7天的7种修饰核苷(5mU、Pseu、N4C、NNdmG、N2mG、1mG、3mU)水平显著降低(P<0.05)。结论构建的LC-MS方法适用于尿修饰核苷的检测;尿修饰核苷对乳腺癌有较高的诊断效能,有助于乳腺癌的临床确诊、肿瘤转移判断、手术根治程度评估,有望成为乳腺癌诊疗的新型无创标记物。