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以体外培养Wistar大鼠脾脏淋巴细胞为研究对象,在培养体系中分别添加终浓度为0(对照组,GC)、0.30(低剂量组,GL)、0.61(中剂量组,GM)和1.21(高剂量组,GH)mmol/L的三氯化铝(AlCl3·6H2O)。采用AO/EB双荧光染色法观察淋巴细胞的凋亡形态;流式细胞术检测细胞凋亡指数;琼脂糖凝胶电泳法检测DNA ladder;JC-1荧光探针法检测线粒体膜电位(Δψm);Western blot检测胞浆内细胞色素C(CytC)蛋白表达量;分光光度法检测Caspase3和Caspase9的活性;实时荧光定量PCR法检测Bcl-2、Bax、Caspase3和Caspase9基因mRNA表达水平。旨在探讨铝致大鼠脾脏淋巴细胞凋亡的线粒体/Caspase依赖性途径,结果表明:1荧光显微镜下可见,GC脾脏淋巴细胞呈绿色的圆形或椭圆形,染铝组均有绿色固缩状早期凋亡细胞、橘红色固缩状晚期凋亡细胞和橘红色圆形或椭圆形坏死细胞。染铝组脾脏淋巴细胞早期凋亡指数与晚期凋亡指数均显著升高,说明铝可诱导大鼠脾脏淋巴细胞凋亡。2DNA ladder分析表明,GC脾脏淋巴细胞无梯形条带出现,染铝组脾脏淋巴细胞均出现典型的DNA梯形带,说明铝可致大鼠脾脏淋巴细胞DNA损伤。3染铝组脾脏淋巴细胞红绿荧光比例显著低于GC,表明铝可引起大鼠脾脏淋巴细胞Δψm下降,导致脾脏淋巴细胞线粒体损伤。4染铝组脾脏淋巴细胞胞浆中CytC蛋白表达量明显增加,说明铝可诱导淋巴细胞线粒体内CytC释放,而产生细胞毒性作用。5染铝组脾脏淋巴细胞内Caspase3、Caspase9活性及mRNA表达量均显著高于GC,说明铝可引发脾脏淋巴细胞Caspase级联反应产生细胞毒性。6染铝组脾脏淋巴细胞Bcl-2、Bax mRNA表达量均升高,Bcl-2/Bax值随染铝浓度增大而升高,表明铝可通过诱导凋亡基因表达调控淋巴细胞凋亡。上述结果说明,铝可通过线粒体/Caspase依赖性途径导致大鼠脾脏淋巴细胞凋亡。本研究结果可丰富铝免疫毒理学资料,为铝免疫毒性的预防奠定理论基础。