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目的从细胞水平研究祁州漏芦水提物(RUWE)对H202诱导人HepG-2细胞损伤的保护作用及其机制,从而得出漏芦对人肝损伤的保护作用。方法1、建立H202诱导HepG-2细胞损伤模型,用不同浓度H202在同一时间和同一浓度H202不同时间处理HepG-2细胞,采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)测定H202对细胞增值抑制作用,试剂盒检测细胞培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)、谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的活性,得到最佳H202诱导HepG-2细胞损伤浓度。2、MTT法检测RUWE对HepG-2细胞毒理作用,得到漏芦对HepG-2细胞无毒作用浓度；将HepG-2细胞分成对照组、模型组、RUWE低、中、高剂量组,HepG-2细胞贴壁后,RUWE按50、100、200mg/L剂量预处理24h后,模型组和RUWE组用H202诱导损伤,对照组补充等体积培养液,采用试剂盒测定培养液上清中LDH、ALT和AST的活性,细胞胞浆中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量,得到RUWE的最佳保护浓度。3、以最佳保护浓度作为研究对象,利用免疫印记法(Western blot)检测细胞中细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、P38丝裂原活化蛋白激酶(P38)及其磷酸化形式蛋白的表达。结果1、H202对HepG-2细胞的损伤作用随剂量的增加和时间的增长而增强,在H202浓度为300μmol/L,作用时间2h时对HepG-2细胞的抑制率为45.78±2.11%,培养液上清中LDH、ALT和AST水平较正常组明显升高(P<0.01),继续升高浓度和延长时间仍能使损伤加强,但幅度趋于平缓。2、不同浓度RUWE预处理后,与模型组相比,RUWE能显著提高细胞生存率；降低HepG-2细胞培养液上清中LDH、ALT和AST水平(P<0.01),且呈剂量依赖；降低细胞内MDA水平(P<0.01),同时增高细胞内SOD的活性和GSH的含量(P<0.01),剂量效果不明显。3、Western结果显示,H202能显著升高HepG-2细胞ERK、JNK、P38及其磷酸化蛋白的表达,与模型组相比,RUWE组中的ERK、JNK蛋白表达均降低,P-ERK、P-JNK蛋白表达显著降低(P<0.01),P38和P-P38蛋白表达无明显变化。结论RUWE对H202所致HepG-2细胞损伤具有明显的保护作用,能显著抑制H202对HepG-2细胞的损伤作用。其作用可能与其增高抗氧化能力,抑制ERK、JNK蛋白活化有关。