芽殖酵母Def1蛋白在维持端粒稳定中的作用

来源 :中国科学院研究生院(上海生命科学研究院) | 被引量 : 0次 | 上传用户:choster
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在20 世纪80 年代初,人们对酵母的生物学机制还不是十分了解,经过生理学家,生物化学学家、显微观测学家和经典的分子遗传学家们几十年的共同努力,已经检测并发现了许多酵母的生物学现象,规划出了许多生物学调控途径,同时也发现了许多问题,甚至已经知道了其中一些的分子生物学机制。染色体DNA的复制有前导链和后随链的分别,而后随链模板DNA结束复制后其RNA引物会被降解,因此染色体末段的端粒DNA会有一段未完成复制,从而导致新合成的子链5’端的端粒DNA部分缺失并形成游离的3’端粒单链DNA,如果细胞再继续几轮复制,而又没有特殊的调节机制来弥补端粒DNA复制的缺陷,细胞的染色体会慢慢缩短从而引发细胞危机。科学家们发现,事实并非如此,细胞可以通过端粒酶,一种特殊的反转录酶来解决端粒DNA的复制缺陷,由此,一系列影响端粒功能的蛋白因子被相继鉴定得到并进行了较深入的研究。Rrm3p是其中一个蛋白因子,而Rrm3蛋白的功能缺失,导致端粒和亚端粒区DNA复制叉不能顺利地通过蛋白-DNA复合体结构,从而在一定程度上影响端粒DNA复制的正常进行,并最终导致了一定程度的端粒DNA延长。我们利用亲和免疫和蛋白质的质谱分析的方法鉴定出与Rrm3蛋白相互作用的Def1 蛋白,在我这篇论文里,我主要介绍我们实验室独立发现的新的端粒调节蛋白-Def1 蛋白的生物学功能。在DEF1 基因缺失的酵母细胞中,和野生型的细胞相比,其端粒缩短约200bp。Def1p功能缺失的酵母细胞还表现出温度敏感,即在37oC的培养条件下不能成活。现有的知识条件告诉我们,在酵母细胞缺失端粒酶的情况下,多数细胞会衰老并最终死亡,在芽殖酵母中,有5个基因对端粒酶本身的活性是必须的,他们分别是:EST1,EST2,EST3,TLC1和CDC13。但有一些细胞可以通过同源重组的办法,扩增复制Y’亚端粒区DNA或
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