【摘 要】
：
O-Glc NAc糖基化修饰是一种发生在细胞浆或细胞核内的蛋白质翻译后修饰。在O-连接N-乙酰葡萄糖胺转移酶（O-linked N-acetylglucosamine transferase,OGT）的作用下,将单个的N-乙酰葡萄糖胺（Glc NAc）连接在蛋白质丝氨酸或苏氨酸残基的羟基氧原子上,O-连接N乙酰葡萄糖胺水解酶（O-linked N-acetyl Glucosamine hydrol
论文部分内容阅读
O-Glc NAc糖基化修饰是一种发生在细胞浆或细胞核内的蛋白质翻译后修饰。在O-连接N-乙酰葡萄糖胺转移酶（O-linked N-acetylglucosamine transferase,OGT）的作用下,将单个的N-乙酰葡萄糖胺（Glc NAc）连接在蛋白质丝氨酸或苏氨酸残基的羟基氧原子上,O-连接N乙酰葡萄糖胺水解酶（O-linked N-acetyl Glucosamine hydrolase,OGA）的作用则相反。作为O-糖基化中特殊的一种存在形式,O-Glc NAc修饰主要发生在细胞质和细胞核中且处于高度动态变化中。很多研究已经表明O-Glc NAc修饰具有多种重要的生物学功能。首先,O-Glc NAc修饰被称为营养-应激感受器并参与了转录、翻译、信号传导等几乎所有的细胞生理过程。同时,O-Glc NAc修饰参与了肿瘤、糖尿病、心血管疾病以及神经退行性疾病等的病理过程。因此,深入研究O-GlcNAc修饰更普遍性的生理学功能具有非常重大的意义。然而,三十多年来人们对O-Glc NAc修饰的研究依然是处于初始阶段。因为O-Glc NAc修饰处于高度的动态变化中,其分子量小且不带电荷,很难通过一般的生化方法检测到。另外O-Glc NAc修饰丰富较低又极为不稳定,在质谱检测时容易脱落。虽然目前已经出现了多种检测方法,也很大程度上推动了Glc NAc修饰的研究,但仍然满足不了当前研究的需要。寻找更加高效便捷的检测方法仍然是Glc NAc修饰研究领域中迫切需要的。适配体（aptamer）是利用指数富集的配基系统进化技术（SELEX）获得的一种“化学抗体”。与传统意义上的抗体相比,适配体具有分子量小,无抗原性,便于合成和修饰等优点。已经有很多高质量的适配体被筛选出来并作为识别、预防、诊断和治疗疾病等过程中的新型试剂。由于SELEX能够筛选多种类型的靶标,大到细胞组织,小到氨基酸或金属离子,因此适配体的应用范围和发展潜力也是非常之大的。我们本研究的目的是利用SELEX技术筛选出能够特异性识别O-Glc NAc修饰的ss DNA适配体。不仅能够作为检测蛋白质O-Glc NAc修饰的新型试剂,还有望用于O-Glc NAc修饰功能的研究中。同时,我们为O-Glc NAc修饰的研究提供了一种新的思路和方法,也进一步拓宽了核酸适配体的发展和应用。我们首先设计并合成了一个单链DNA（ss DNA）文库(库容量约为1015),该文库模板长度为77nt,两端为固定序列中间含有30个随机序列(库容量约为1015)。其次将O-Glc NAc修饰多肽偶联到纳米金颗粒上作为筛选靶标,并用未修饰的多肽进行反筛。通过PCR将每轮筛选的适配体进行扩增,经过多轮筛选后用ELONA法检测各次级文库的亲和力大小,并将亲和力最大的适配体文库进行高通量测序（NGS）后进行分析并确定出了十条候选适配体。然后用微热量泳动技术（MST）检测候选适配与O-Glc NAc修饰多肽和未修饰多肽的结合情况,筛选出apt O-14、apt O-19和apt O-31三种能特异性结合O-Glc NAc修饰的适配体。用ELONA法测定三种适配体与O-Glc NAc修饰多肽结合的亲和力大小,得到亲和力和特异性最大的apt O-19适配体,其Kd值813±131nM。
其他文献
随着我国老龄化进程逐步加快,老年人口在全国人口中的占比逐年增加,老年人的养老和健康等问题关系着社会的和谐和稳定。虽然国家在老年人的健康养老保障问题方面做出了大量的支持,但是在中国传统家庭模式下,家庭支持体系对老年人的健康尤为重要。因此,在研究老年人情绪健康的问题时,讨论子女赡养行为十分必要。老年人乐观情绪指当老年人的需求被满足时,所产生的对现在满意、对未来幸福生活感到期待的主观情绪体验。研究子女赡
提取学习,也被称为提取练习（Retrieval Practice）,指学习者认真回忆先前所学习的内容,在大脑中进行总结概括,并用自己的方式将其表达出来的学习策略。提取效应（Retrieval Effect）指的则是在一个等值的时间里,对某个学习材料进行一次或多次的信息提取要比重复学习这个材料在将来产生更持久的记忆保持。在过去的十年间,有关提取学习的研究产生了质的增长。国内外学者不仅将研究地点从实验
随着网络技术的普及与发展,当代学生的学习主要架构于信息化基础之上,信息技术的发展推动了学生学习方式到内容的一系列根本性变革。各大高校为了学生更好地获取知识,开辟新的渠道与途径,开发各样的线上平台,如:入驻“云班课”,“spoc”平台,雨课堂软件的使用等,能够让学生充分借助网络信息资源,结合线上平台自学以及课堂教学更好地完成学习任务,且增添学习过程中的趣味性,一定程度上使学生充分投入到英语学习过程中
西部大开发是党中央、国务院在世纪之交作出的重大战略决策,实施至今已逾二十年,西部地区经济社会发展各个方面都取得了重要进展:经济增长速度加快,社会事业蓬勃发展,环境保护取得显著成就,人民生活水平不断提高。深入实施西部大开发战略离不开有力的科技和人才支撑,归根结底是离不开教育特别是高等教育的支撑。西部高等教育发展不仅是一个重要的教育问题,更是一个相当复杂的社会问题。如果没有西部高等教育竞争力的提升,就
当前,我国正处于社会经济转型的关键期,国际形势错综复杂,国内改革任务艰巨繁重,特别是受新冠肺炎疫情的持久冲击,各类社会矛盾凸显,尤其是劳动关系领域表现最为活跃、尖锐,劳资双方围绕工资等相关利益的争议不断,劳资事件频发。同时,随着信息和数字化时代的到来,共享经济、平台经济不断发展,传统的劳动关系遭到冲击,衍生出“第三类劳动者”的用工关系,依据现行的劳动法律法规,这类劳动者被排除在劳动关系与劳务关系的
知识经济带来的智能时代推动着课程以及教师教育不断进行改革,教师需要学习成为不可避免的时代趋势。与此同时,教师学习在外语教师教育研究领域也占据着重要地位,外语教师的持续学习不仅可以为外语教学转型奠定基础,还可以为外语教学改革指明方向。英语教师学习是外语教师教育发展的重要组成部分,英语教师学习动力是英语教师产生学习行为的重要前提和根本保证。本研究通过对国内外有关教师学习动力以及外语教师学习相关文献资料
随着我国高等教育改革的深入,学习投入作为一项反映学生学习状态的重要标志而备受关注。学习投入不仅可以衡量学生学习效率,还可以评估教师教学效果,对学习的发生以及教学目标的达成具有重要作用。当前混合学习环境下,我国大学英语“教”的投入不少,而“学”的投入却不多,整体学习效率较低,教学效果不佳。而纵观现有相关研究,基于混合学习环境展开的大学英语学习投入研究甚少,故很有必要进行本研究。即,探究混合学习环境下
近年来,英语写作者的身份在国内外研究中备受关注,现有研究多聚焦于期刊论文和硕博论文作者,而对大学英语议论文作者身份关注较为欠缺。议论文写作能力是大学生应具备的重要写作能力,写作者在写作过程中不仅表达语篇意义、也建构人际意义,即写作其实是一种身份建构行为。在一系列建构身份的话语资源中,自称语是建构作者身份最直接的方式。本研究聚焦议论文写作者身份,根据作者身份理论,自称语分析框架,以及议论文写作框架建
我国教育体制改革的深入让后进生的转化问题进入了学校的关注范围,尤其是在小学。后进生的产生原因多种多样,心理、环境等各方面都有可能会让学生成为后进生。但总的来说,相比于优等生,后进生是更需要老师的关心和帮助的。基于此,本文将结合实际情况,从分析后进生的心里特点、实行分层教育以及及时给予后进生以尊重和帮助三个角度出发,分析在小学数学教育中转化后进生的办法,为每一个小学生的全面发展提供帮助。
语言是人类表达和沟通的重要工具。交际的展开离不开问候语,问候语在交际过程中作为一个开端虽短暂却极为重要。一个人如果能够在一定的场合使用恰当的问候语,良好的交际已经完成了一半。对于中、高级的汉语学习者来说,在了解基本的问候语后,能够正确、自然地使用问候语尤为重要,这是中高级汉语学习者区别于初级汉语学习者的重要标志,其表现可以说明该学习者不仅掌握了基本的语言知识,同时也对该语言背后的文化内涵有了一定程