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目的胃癌是一种发病率和病死率均较高的恶性肿瘤,目前,胃癌的治疗方式主要以手术切除及术后化疗为主,但患者术后复发率和转移率较高,且化疗药物存在很多不良反应,因此,对新型抗胃癌药物的研发已是发展所趋。有研究表明,金丝桃苷(Hyp)这种黄酮类化合物,具有抗肺癌、胰腺癌、食管癌等恶性肿瘤的作用,但对抗胃癌MKN-45细胞的研究机制尚未见报道。本文主要探讨金丝桃苷对人胃癌MKN-45细胞增殖及凋亡的影响,进一步研究金丝桃苷的抗肿瘤作用。方法1、将人胃癌MKN-45细胞株置于含10%胎牛血清(FBS)的高糖DMEM培养基中,于37℃,5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养。2、次日MKN-45细胞贴壁后,实验组分别加入Hyp(12.5、25、50、100、200μg/m L)作用24、48h,对照组加入等量DMEM培养液。3、MTT法检测经Hyp处理后的细胞活性,观察Hyp对MKN-45细胞增殖的影响并筛选实验适宜药物时间及浓度。4、流式细胞术检测经Hyp处理48h后,MKN-45细胞周期变化及凋亡率,观察金丝桃苷对MKN-45细胞凋亡的影响。5、Western blot技术分析经Hyp处理48h后,MKN-45细胞中NF-κB P65、IκBα、caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白的表达情况,观察金丝桃苷对MKN-45细胞凋亡的影响。结果1、MTT结果显示,经不同浓度Hyp(12.5、25、50、100、200μg/m L)分别处理MKN-45细胞24、48h后,相同时间内不同浓度药物作用于细胞,最低剂量组(12.5μg/m L)与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),其他药物处理组细胞的增殖率随药物浓度的增加而减少,且与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组中相同浓度药物作用不同时间,两两相比,50、100μg/ml组差异有统计学意义(P<0.05),MKN-45细胞的增殖呈时间-浓度双重依赖性。2、流式细胞术结果显示,经Hyp处理MKN-45细胞48h后,G0/G1期细胞比率增加,M,G2/M期细胞比率减少,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01),Hyp可将MKN-45细胞周期阻滞于G0/G1期。3、流式细胞术结果显示,经不同浓度Hyp处理MKN-45细胞48h后,凋亡率对照组相比显著增加(P<0.01),Hyp可诱导MKN-45细胞凋亡。4、Western b Iot显示,不同浓度金丝桃苷处理MKN-45细胞48h后caspase-3、Bax、IκBα表达增高,NF-κB P65、Bcl-2蛋白表达降低,且差异均有统计学意义(P<0.05),进一步说明Hyp可诱导MKN-45细胞凋亡。结论1、金丝桃苷可抑制MKN-45细胞增殖并呈时间及浓度依赖性。2、金丝桃苷诱导MKN-45细胞凋亡其机制可能与MKN-45细胞阻滞细胞周期,抑制NF-κB通路,下调NF-κB P65、Bcl-2蛋白,上调IκBα、caspase-3、Bax蛋白有关。