Mir-130a在新疆维吾尔族肥胖和非肥胖人群的差异表达及其对3T3-L1脂肪细胞分化的影响

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目的:(1)初步探讨新疆维吾尔族肥胖人和非肥胖人外周抗凝全血中mir-130a的差异表达及相关性分析。(2)在3T3-L1脂肪细胞模型中,探讨mir-130a对脂肪分化的调节作用机制及其对脂肪分化的影响。方法:(1)按照亚太地区推荐对肥胖诊断的标准,选择维吾尔族肥胖与非肥胖组抗凝全血样本各5例,采用芯片筛选出差异表达的mir-130a;后扩大样本量,维吾尔肥胖:非肥胖=21:17,测量身高、体重、腰围、臀围后,留取血样检测空腹血糖、血脂等指标,采用Real-Time PCR检测差异表达的microRNA及其靶基因的表达。(2)以3T3-L1前脂肪细胞为研究对象,用传统“鸡尾酒法”诱导细胞分化成脂,用Real-Time PCR检测脂肪细胞诱导分化前后,mir-130a的表达情况。在脂肪细胞诱导分化的第0天,转染mir-130a的模拟物和mir-130a的抑制物,72小时后westemblot检测mir-130a的靶基因化物酶体增殖物激活受体1(PPAR-y)蛋白的表达,Real-Time PCR检测脂肪分化特异性基因LPL、Glut4、PPARγ、CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBP-α)的表达水平。结果:(1)芯片结果显示,与非肥胖组相比维吾尔族肥胖组抗凝全血中mir-130a的表达量下降(1.14±0.32 vs 0.28±0.13,P<0.05);(2)维吾尔族肥胖组体重指数、腰围、臀围以及收缩压均大于非肥胖组,并且差异有统计学意义(P<0.05);(3)Real-Time PCR验证结果显示,与非肥胖组相比维吾尔族肥胖组抗凝全血中mir-130a表达量降低(3.43±0.88vsl.23±0.35,P<0.05);相关分析结果在维吾尔族抗凝全血中mir-130a的表达量与身高(r=-0.377,P<0.05)空腹血糖水平(r=-0.408,P<0.05)呈负相关,与高密度脂蛋白胆固醇水平呈正相(r=0.377,P<0.05)(4)细胞水平结果显示:mir-130a在成熟脂肪细胞中的表达量高于诱导分化前的脂肪细胞(2.79±0.35vs0.52±0.12,P<0.05)。(5)westemblot检测蛋白发现:与对照组相比,过表达mir-130a细胞组PPARy蛋白水平表达量降低。(6)过表达mir-130a,使脂肪分化特异性基因PPARy,LPL,CEBP-α,GUT-4的表达下调。结论:(1)抗凝全血中mir-130a的表达量在维吾尔族肥胖人群中显著降低,提示mir-130a表达量降低可能与维吾尔族BMI有关。(2)mir-130a在3T3-L1脂肪细胞中过表达通过抑制PPARγ的表达,降低了脂肪分化的特异性基因的表达,抑制脂肪细胞的分化成脂。
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