在温室效应加剧和全球气候变暖的大背景下植物作物生长发育面临巨大的挑战。植物通过调节其生长发育进程,迅速适应环境温度的升高。现今许多科学的研究已经着眼于了解植物如何感知和响应环境温度的升高。然而,暖温信号如何由热传感器传递到下游转录调节因子仍不甚清楚。因此,我们采用蛋白质组学技术研究鉴定植物热响应过程中的早期调控因子。为了减少光合作用相关蛋白对组学分析的影响,我们对黑暗下生长的经过温和高温（29℃）处理或不处理（22℃）的拟南芥黄化苗进行了TMT（串联质谱标签）标记的蛋白质定量组学和差异磷酸化修饰定量组学分析。总体来说,在蛋白质定量组学研究中,我们鉴定到的8800个蛋白质中有7956个蛋白质可以定量,其中14个蛋白的表达水平受温和高温诱导上调,13个蛋白的表达水平受到温和高温诱导下调;而在差异磷酸化修饰定量组学研究中,我们鉴定到了5125个蛋白质上的14191个磷酸化位点,其中4196个蛋白上的10700个磷酸化修饰位点具有定量信息,在这些蛋白中有200个位点（对应180个蛋白质）的磷酸化水平受温和高温诱导上调,120个位点（对应87个蛋白）的磷酸化水平受温和高温诱导下调。GO富集分析表明,与磷传递相关的分子功能等在差异磷酸化修饰的蛋白中有所富集。我们选择了磷酸化水平受温和高温诱导上调的ATL6（ARABIDOPSIS TOXICOS EN LEVADURA 6）、CID2（CTC-INTERACTING DOMAIN2）和NF-YB10（NUCLEAR FACTOR Y,SUBUNIT B10）进行磷酸化位点的验证。我们构建了ATL6和CID2正常形式和模拟去磷酸化突变形式的过表达材料,发现突变形式的ATL6（S343A S357A）和CID2（S31A）分别较正常形式的ATL6和CID2蛋白的蛋白稳定性在体内体外都有所降低。并且温和高温条件下,ATL6过表达能够轻微促进黑暗下的下胚轴伸长,抑制光照下的下胚轴伸长。除此之外,我们发现过表达NF-YB10能够抑制光照下温和高温诱导的下胚轴的伸长和热响应基因的上调,而模拟去磷酸化的突变形式的NF-YB10（S21A）能够加剧这个过程,说明NF-YB10是热形态建成的负调控因子,其21位的丝氨酸的磷酸化修饰调控对这一过程至关重要。综上所述,我们的蛋白质组学数据显示了在温和高温响应过程中拟南芥蛋白质组发生了广泛的蛋白磷酸化修饰,这些结果为今后研究植物热形态建成的分子机理提供了新的候选蛋白/基因。