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目的观察脑内注射脂多糖(LPS)引起的脑内M1型小胶质细胞极化对实验动物焦虑样行为的影响,并试图通过Myd88抑制剂MIP逆转LPS带来的炎症反应。探究实验动物焦虑样行为的改变与中枢小胶质细胞极化的关系。材料与方法本实验将C57雄性小鼠随机分为4组,第一天每两组分别单侧侧脑室注射Myd88抑制剂(MIP)和Myd88对照肽(CP),第二天第一组再次注射生理盐水、第二组注射LPS、第三组注射生理盐水、第四组注射LPS,即四个实验组分别为CP-Con、MIP-Con、CP-LPS、MIP-LPS。最后一次脑内注射48 h后观察实验动物焦虑样行为的改变,用免疫荧光染色观察内侧前额叶皮质和海马区i NOS、Arg-1的表达,用Western Blot的方法检测内侧前额叶皮质和海马区IL-1β、TNF-α、iNOS、Arg-1、Myd88、P-IRF3等分子的表达。结果1.模型建立后行为学的改变模型建立48 h后,旷场实验显示CP-LPS组相较于其他三组小鼠在中央活动的距离最短,中央活动的时间最少,这提示CP-LPS组相较于其他三组小鼠表现出更明显的焦虑样行为;MIP-LPS组的中央活动距离和时间显著高于CP-LPS,这提示MIP能够逆转LPS引起的焦虑样行为。高架十字迷宫实验中CP-LPS组相较于其他三组小鼠在开臂活动的时间最少,活动的距离最短,这提示CP-LPS相较于其他三组小鼠表现出更明显的焦虑样行为;MIP-LPS组在开臂活动的时间和距离显著高于CP-LPS,这再次提示MIP能够逆转LPS引起的焦虑样行为。2.不同处理组实验动物的海马和内侧前额叶皮质小胶质细胞的活化情况免疫荧光结果显示,在与焦虑样情绪相关的脑区,包括海马的DG、CA1、CA2区及m PFC内CP-LPS组有更多的M1型小胶质细胞的激活,而MIP-Con组和MIP-LPS组有更多的M2型小胶质细胞激活。3.不同处理组实验动物的关键脑区的重要分子蛋白表达量的变化Western Blot的结果显示,在与焦虑样情绪相关的脑区包括:海马的DG、CA1、CA2区及mPFC内CP-LPS组有更多的M1小胶质细胞蛋白标记物iNOS的表达,而MIP-Con和MIP-LPS组有更多的M2型小胶质细胞蛋白标记物Arg-1的表达。CP-LPS组有更多的促炎因子IL-1β、TNF-α的表达。MIP-Con组和MIP-LPS组Myd88非依赖通路关键分子P-IRF3的表达显著增高。结论LPS能够诱导小胶质细胞向M1型极化,并且可能引起实验动物的焦虑样行为。MIP可以逆转LPS的作用,缓解LPS引发的实验动物的焦虑样行为。这种调控可能通过Myd88非依赖通路实现且与小胶质细胞向M2型极化密切相关。