目的:南极磷虾是南极海域可大规模开发利用的重要生物资源之一,富含虾青素等活性物质。本研究旨在建立高效液相色谱-高分辨质谱(HPLC-HRMS)定性定量分析方法,开展不同来源虾青素结构和组成的差异研究,用柱层析法对南极磷虾虾青素进行分离纯化、鉴定,并用衰老小鼠模型对其进行抗氧化活性评价研究。方法:建立南极磷虾虾青素酯的高效液相色谱-高分辨质谱(HPLC-HRMS)高通量识别和定量方法。以南极磷虾为原料,采用硅胶柱层析和薄层层析法分离制备高纯度的虾青素,采用高效液相法对三种形态的虾青素进行定性定量测定。利用制备纯化的虾青素酯进行D-半乳糖致衰老小鼠的抗衰老实验,比较合成虾青素与南极磷虾来源虾青素抗氧化活性的差异。结果:本研究采用HPLC-HRMS法一共鉴定出27种虾青素酯。其中,含量较高的虾青素双酯是:Asta-C14:0/C16:0、Asta-C14:0/C14:0、Asta-C16:0/C16:0;含量较高的虾青素单酯是Asta-C14:0、Asta-C16:0和Asta-C18:1。硅胶柱层析以不同比例的丙酮-石油醚体系进行梯度洗脱,可以分离制备虾青素双酯、单酯及游离虾青素;V(正己烷):V(丙酮):V(乙酸)=8:2:0.2的混合溶剂为薄层层析最佳展开剂。南极磷虾中虾青素双酯和单酯中3R,3′R所占比例>70%,3S,3′S的比例最低。本研究发现虾青素对D-半乳糖致衰老小鼠有保护作用。与模型组相比,虾青素干预组小鼠的血清、肝脏和脑组织中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化酶,过氧化氢酶等抗氧化酶的活性较模型组有明显升高(P<0.05),总抗氧化能力也有明显增强(P<0.05),丙二醛的含量显著降低(P<0.05)。且南极磷虾来源虾青素在抗氧化酶的活性的增强方面比合成虾青素强。结论:建立了南极磷虾中虾青素的高分辨、高通量质谱法,具有高灵敏度和高准确性的优点,能够解析虾青素酯的结构和组成,对南极磷虾资源开发提供了技术支撑。利用硅胶柱层析法实现了对不同形态虾青素的分离,并发现南极磷虾来源虾青素对D-半乳糖致衰老小鼠有明显的抗衰老作用,可以通过提高机体总抗氧化能力,减少脂质过氧化产物的产生,减轻肝脏病理学损伤,达到延缓衰老的目的。且南极磷虾虾青素的抗氧化效果优于合成虾青素。