【摘 要】
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21世纪以来因抗生素在农、林、牧以及医疗领域的大量使用导致超级（抗药）细菌出现愈发频繁,进而引发医疗、社会资源的浪费,为解决这一急迫的现实问题开发抗生素替代品是一种有效解决途径。植物精油作为植物源次生代谢物具有驱虫、灭菌、抗病毒等优秀生物活性。且这些生物活性是由数十种有机化合物组分协同作用所产生的效果,能有效降低有害微生物产生耐药性,将其开发为抗生素替代品有着广阔且良好的研究前景。本文选用原产地澳
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21世纪以来因抗生素在农、林、牧以及医疗领域的大量使用导致超级（抗药）细菌出现愈发频繁,进而引发医疗、社会资源的浪费,为解决这一急迫的现实问题开发抗生素替代品是一种有效解决途径。植物精油作为植物源次生代谢物具有驱虫、灭菌、抗病毒等优秀生物活性。且这些生物活性是由数十种有机化合物组分协同作用所产生的效果,能有效降低有害微生物产生耐药性,将其开发为抗生素替代品有着广阔且良好的研究前景。本文选用原产地澳洲引种中国后互叶白千层所提取的精油,与山苍子、牛至精油进行复配。研究互叶白千层及其复配精油对3种常见食源性微生物的抑菌活性、化学组分构成、抑菌稳定性和抑菌机理。得出研究结果如下:（1）以革兰氏阴性大肠埃希氏菌、革兰氏阳性金黄色葡萄球菌和真菌酿酒酵母为供试菌种通过含药（精油）贴片测试法,得出互叶白千层、山苍子、牛至精油对3种受试菌都能表达出抑菌活性,但单种精油对不同菌种抑制强度存在明显差异。通过抑菌圈直径、浓度梯度下的抑菌性能和MIC/MBC数值综合分析选取抑菌活性较强的山苍子精油与互叶白千层精油进行复配,并以抑菌难度最高的大肠杆菌作为受试菌测试不同配方下复配精油抑菌活性。确定互叶白千层精油:山苍子精油以6:4的体积比得出的抑菌活性最佳,在精油浓度18.00mg/mL时对大肠杆菌抑菌圈范围达到18.36±0.41mm,对比单方互叶白千层精油提升9.74%;对3种受试菌最低抑菌浓度MIC为1.12-2.25 mg/mL,对比单方互叶白千层精油提升0-4倍。（2）通过GC-MS气象色谱-质谱联用仪结合NMR核磁共振内标法分析互叶白千层及其复配精油化学组分构成和相对含量。结果表明互叶白千层精油由20种化学组分构成其中主要成分为1,8-桉叶素（35%-38%）、α-松油醇（21.0%-24.0%）与α-萜品烯（9.0%-12.0%）共占精油组分的65-74%,属于“桉型”茶树油;复配互叶白千层（6:4）由26种化学成分构成其中主要成分为1,8-桉叶素（34%-34.5%）、柠檬醛（16.5%-17.0%）、4-松油醇（14.2%-14.5%）与香茅醛（11.2%-11.9%）合计占比75.9%-77.9%。复配后对比单方精油醇类与烃类化合物种类数量上升相对含量下降,新增醛类与酮类化合物共3种;原有醚类化合物1-Bromo-2,3,3-trifluoro-1-cyclopropene消失。互叶白千层精油主要化学组分复配后其相对含量下降幅度不与体积比计算相同,可能存在多种化合物之间反应消耗。复配精油中主要特征组分联用测试显示了精油特征组分间存在多种相互作用机制,最终对大肠杆菌的抑菌性结果表明复配提升了精油的抑菌性能:4-松油醇与柠檬醛联用起到协同作用;4-松油醇与1,8-桉叶素联用起到相加作用;1,8-桉叶素与柠檬醛呈现无相关性作用。（3）测试了互叶白千层及其复配精油在不同环境pH,加热处理和紫外照射对精油抑菌活性影响。发现环境pH对精油抑菌活性有显著影响,在pH≤6偏酸性条件下抑菌活性提升,pH≥7偏碱性条件下抑菌活性减弱。高温加热与紫外照射对精油抑菌活性保持稳定无显著影响。（4）互叶白千层及其复配精油精油对3种受试菌的生长曲线、细胞溶出物、胞外钾离子浓度与营养物质利用的有显著影响。通过结果分析抑菌机理是通过抑制细菌生命活动活性降低对外界碳源、氮源等营养物质的利用抑制细菌生长繁殖数量;另一方面是通过影响细菌细胞壁膜系统稳定性与完整性进而导致细菌死亡。
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