杂种优势育种是近代植物育种中成就最突出的领域之一，利用雄性不育系是杂种优势育种最重要的途径之一，其中，基因工程雄性不育系的创建和利用被作为最具前景的育种途径，成为当今世界范围内研究、开发和利用的热点。茄子是我国的一种重要蔬菜作物，具有较强的杂种优势。目前开展茄子优势育种主要利用自交系进行，在茄子杂种一代种子生产上，主要利用自交系通过人工去雄授粉的办法进行，导致制种成本高，种子价格昂贵。利用茄子雄性不育系开展优势育种及生产杂交一代种子尚未见报道，因此本研究利用基因工程方法把雄性不育基因及恢复基因转到茄子中，利用Cre/loxp系统重组技术，旨在为选育茄子雄性不育三系找到一条新的途径。本研究以“三月茄”为实验材料，以Barnase基因与Cre基因为目的基因进行遗传转化研究，取得以下的研究结果： 1、建立了茄子高效再生体系 主要探讨了不同植物生长调节剂、不同外植体类型、接种方式等因素对茄子不定芽分化影响及生根培养基对不定芽生根的影响。结果表明：不定芽分化率最好的培养基为MS+IAA(0.2 mg·L-1)+6—BA(2.0 mg·L-1)+ZT(1.0 mg·L-1)；不同外植体，不定芽分化率存在差异，其中类Flamingo—bill外植体最高，达到100％，下胚轴的不定芽分化率达到98.1％，带柄子叶的不定芽分化率达到60.2％；不同接种方式也会影响茄子不定芽分化，下胚轴正向扦插较横向平接能提高不定芽的分化率和不定芽分化系数，还能提前分化；茄子不定芽在MS固体培养基上生根效果最好，生根率达到100％。 2、建立了茄子的遗传转化体系 通过探讨抗生素种类、浓度，选择压和外植体种类等因素对茄子遗传转化的影响，最终建立三月茄的遗传转化体系，即：三月茄种子表面消毒后，播种于1/2MS培养基获得无菌苗；将12d苗龄无菌苗的下胚轴切段成1cm左右，正向插接在分化培养基[MS+IAA(0.2 mg·L-1)+6—BA(2.0 mg·L-1)+ZT(1.0 mg·L-1)]上预培养2d，用OD600≈0.8的农杆菌工程菌液浸染10min左右后取出，无菌滤纸吸去残留菌液，超净工作台上晾干后，重新接入分化培养基中，暗培养2d；转接至含Km100 mg·L-1和Cef400 mg·L-1的抑菌筛选培养基上，对获得的不定芽进行多代筛选，淘汰未转化的白化芽和嵌合体，获得少数具Km抗性的绿色不定芽，将伸长的不定芽切下诱导生根，获得抗性苗。 3、对转化植株的进行分子生物学鉴定 对转基因抗性植株，经过PCR、Southern和RT-PCR等分子生物学方法检测后，得到了6个转Barnase基因和6个转Cre基因的转基因植株株系，其外源目的基因已经整合到受体基因组中，以单拷贝形式存在，并且得到表达，但Barnase基因的表达存在部位差异性，只在花中表达。转化率分别为8.1％和10.3％。 4、对转基因植株的植物学性状进行鉴定及杂交研究 花粉离体萌发和花粉TTC染色试验表明转化Barnase基因的转基因植株的花粉无活力，非转基因植株和Cre基因转基因植株的花粉萌发率和染色率都在90％以上，花粉活力正常；转Barnase植株自交不能结实或得到无种子的果实；Barnase转基因植株与非转基因植株和Cre转基因植株的杂交，能够正常结果，且能够得到成熟的种子。