【摘 要】
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目的:探讨护卵汤对雷公藤多苷诱导POI模型小鼠卵巢组织影响:通过检测卵巢中凋亡相关蛋白 SIRT1,肿瘤抑制基因p53,乙酰化p53（Ac-p53）,p21,NF-κB表达情况,揭示护卵汤改善卵巢功能的作用机制,为疾病病因病理研究和临床治疗提供理论依据。方法:50只雌性C57BL/6J小鼠适应性喂养7d,通过瑞氏染色观察,将有正常动情周期小鼠随机分正常组,模型组及护卵汤低、高剂量组,西药组（戊酸雌
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目的:探讨护卵汤对雷公藤多苷诱导POI模型小鼠卵巢组织影响:通过检测卵巢中凋亡相关蛋白 SIRT1,肿瘤抑制基因p53,乙酰化p53（Ac-p53）,p21,NF-κB表达情况,揭示护卵汤改善卵巢功能的作用机制,为疾病病因病理研究和临床治疗提供理论依据。方法:50只雌性C57BL/6J小鼠适应性喂养7d,通过瑞氏染色观察,将有正常动情周期小鼠随机分正常组,模型组及护卵汤低、高剂量组,西药组（戊酸雌二醇）,采用雷公藤多苷80 mg.kg-1·d-1连续灌胃,第15天予护卵汤低、高剂量组1.6,6.2 g.kg-1.d-1灌胃,西药组予戊酸雌二醇0.13 mg.kg-1·d-1,连续21 d,正常组予等量蒸馏水,观察动情周期变化。末次给药后取血和卵巢,HE染色观察卵巢组织形态学变化,ELISA检测血清中AMH,FSH,LH水平含量,RT-PCR检测 p53,p21 mRNA 表达水平,Western blot 检测 SIRT1,p53,p21,Ac-p53,NF-κB蛋白表达水平。结果:1.卵巢形态:通过HE染色观察,模型组与中药低剂量组卵巢明显缩小,各级卵泡数目均减少。正常组卵巢组织结构完整,可见各级卵泡形态正常,生长卵泡颗粒细胞多层,卵丘、卵母细胞可见,中药高剂量组同西药组卵巢组织结构大小与正常组比较无明显差异。模型组卵巢内各级卵泡数目均减少,形态扭曲发育不良。2.ELISA:对POI小鼠血清中AMH,FSH,LH的影响 与正常组比较,模型组 AMH 显著降低,FSH,LH含量均显著升高（P＜0.0 1）;与模型组比较,西药组、护卵汤低、高剂量组AMH显著升高,FSH,LH显著降低（P＜0.01）。3.PCR:与正常组比较,模型组p53及p21 mRNA相对表达水平均显著升高（P＜0.01）;与模型组比较,护卵汤低、高剂量组及西药组p53及p21 mRNA表达均显著降低（P＜0.01）;护卵汤高剂量组与西药组比较,差异无统计学意义。4.WB:与正常组比较,模型组SIRT1表达显著降低,Ac-p53,p53,p21,NF-κB蛋白表达均显著升高（P＜0.01）;与模型组比较,西药组、护卵汤高剂量组中Ac-p53,p53,p21,NF-κB蛋白表达均显著降低（P＜0.01）,SIRT1表达显著升高（P＜0.01）,护卵汤低剂量组p21,NF-κB蛋白表达显著降低（P＜0.01）。结论:护卵汤的治疗可明显扭转衰老进程,对改善卵巢功能,具有明显治疗作用,且高剂量治疗效果优于低剂量。护卵汤可上调SIRT1,使衰老蛋白p53,p21的mRNA和蛋白表达下降,同时下调炎症因子NF-κB,改变细胞凋亡状态相关,从而增加了生长卵泡及成熟卵泡含量,降低了闭锁卵泡的含量。
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