油菜（Brassica napus L.）是当今世界第三大油料作物,占全球植物油总产量的13%。非生物胁迫和生物胁迫都会降低菜籽的产量和质量。因此,对油菜逆境中分子应答机制进行深入解析,有利于遗传育种,提高作物产量。NAC转录因子作为植物特有的一类转录因子,在油菜响应逆境中具有着重要的生物学功能。NAC转录因子不仅可以调控植物生长发育,也可以通过影响下游胁迫响应基因的转录,增强植物对逆境的抗性。本文对油菜和拟南芥（Arabidopsis thaliana）中同源NACa的分子机制进行了研究。首先,对AtNACa进行亚细胞定位,发现AtNACa定位在细胞核中。通过组织化学染色,发现AtNACa在幼苗的根和叶脉中表达;在成熟植物的花萼、长角果、花粉中表达。为了进一步研究AtNACa的功能,获得了AtNACa诱导型株系。AtNACa过表达可影响幼苗的生长发育,根延伸长度明显变短,叶片显著变小。随后,对AtNACa诱导型过表达株系进行了氧化胁迫、渗透胁迫及自然衰老测试。结果表明,AtNACa诱导型过表达株系对氧化胁迫和渗透胁迫具有一定的耐性,甲基紫精（Methyl Viologen,MV）和甘露醇处理下,过表达植株的根长延伸比率要高于对照株系,过表达AtNACa基因株系与对照株系叶片大小没有差异。这可能由于,AtNACa可诱导体内产生ROS（reactive oxygen species,ROS）,而适宜浓度的ROS可以引起植物体产生驯化作用,因此,过表达AtNACa株系对于逆境具有一定的抗性。在衰老测试中,AtNACa过表达促进过氧化氢（hydrogen peroxide,H2O2）累积,叶绿素含量降低,离子泄露率增加。这表明,AtNACa持续表达可产生过量活性氧,诱导叶片的衰老。最后,对活性氧、衰老和细胞死亡的标志基因进行双荧光素酶分析（Dual-LUC）。结果发现,AtNACa可以激活双功能核酸酶基因（bifunctional nuclease 1,BFN1）和C2H2型锌指家族蛋白基因（C2H2-type zinc finger family protein,ZAT12）的转录。通过qRT-PCR技术,对不同衰老时期的油菜叶片中BnaNACa的转录本水平进行检测。结果发现,BnaNACa在幼苗时期、成熟时期、早期衰老时期的表达量较低,在晚期衰老时,表达量显著上升,说明了BnaNACa对植物晚期衰老具有重要的作用。BnaNACa在油菜原生质体中瞬时表达后进行了2’,7’-二氯二氢荧光素乙酸乙酯（2,7-dichlorodihy-drofluorescein diacatate,H2DCFDA）和二乙酸荧光素（Fluorescein diacetate,FDA）染色,可以发现BnaNACa的表达可以促进细胞内ROS累积和细胞死亡。通过Dual-LUC分析,表明BnaNACa可以激活下游多个调控ROS生成、细胞死亡、衰老及防御相关标志基因的表达。因此,BnaNACa可作为ROS代谢和细胞死亡的正调控因子,促进ROS累积和细胞死亡。因此,我们对BnaNACa及其拟南芥同源基因AtNACa进行了功能探究,解析ROS和细胞死亡的分子机制,为油菜遗传育种提供了一定的理论基础。