深低温停循环下大鼠的脑保护研究

来源 :宁夏医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jyk1987525
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目的建立一种深低温停循环(DHCA)的大鼠模型,研究DHCA对大鼠各生命体征及神经功能的影响。并研究在DHCA下尼莫地平及联合间断灌注脑保护液分别对大鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制,比较它们脑保护的效果,为临床成熟应用DHCA技术提供可靠、丰富的实验依据。方法第一部分:DHCA下大鼠全脑缺血模型的建立:SD雄性大鼠30只,随机分为实验组(二血管阻断加低血压)和对照组(不给予二血管阻断加低血压),每组15只,监测比较两组大鼠降温前、停循环(21±1)℃时及复温至32℃时的血压及心率。并用Longa等的5级评分标准评定再灌注4h大鼠神经系统损伤情况,采用HE染色法于再灌注24h观察脑组织病理变化。第二部分:深低温停循环下尼莫地平的大鼠脑保护作用研究:96只DHCA模型SD雄性大鼠随机均分为DHCA组(单纯DHCA)和尼莫地平组(DHCA+尼莫地平),每组再分为缺血后再灌注0h(T1)、2h(T2)、6h(T3)、12h(T4)、24h(T5)及48h(T6)共6个亚组,每组8只;检测不同时间点大鼠血清S100含量及脑含水量,并采用HE染色法观察脑组织病理变化。第三部分:深低温停循环下间断灌注脑保护液联合尼莫地平的大鼠脑保护作用研究:SD雄性大鼠60只,随机均分为3组,每组20只。A组:单纯DHCA;B组:DHCA+间断灌注脑保护液;C组:DHCA+间断灌注脑保护液+尼莫地平。检测各组DHCA再灌注24h血清S100含量,并采用HE染色法、原位缺口末端标记法(TUNEL染色法)观察和测定脑组织神经细胞凋亡的情况。结果第一部分:(1)实验组大鼠死亡率为13.3%,对照组无大鼠死亡。(2)两组大鼠在降温前和复温至32℃时血压、心率等指标无显著差异(P﹥0.05),在停循环(21±1)℃时血压、心率等指标均有显著差异(P<0.01)。(3)两组大鼠4h后作Longa5级神经系统的损伤评定,显示存在显著差异(P<0.05)。(4)实验组大鼠脑组织在24h后出现明显的病理变化,对照组大鼠脑组织则无明显病理变化。第二部分:(1)DHCA组和尼莫地平组的血清S100蛋白含量及脑组织含水量在2h开始升高,24h达高峰,48h开始降低;与模型组相比,尼莫地平组的血清S100蛋白含量各时间点均低于DHCA组(P<0.05或P<0.01)。(2)脑含水量从T2~T5均低于模型组(P<0.05或P<0.01)。(3)HE染色示:两组大鼠脑组织在缺血再灌注24h均出现明显的病理变化,但尼莫地平组较DHCA组明显减轻。第三部分:三组大鼠全脑缺血再灌注24h后,与A组比较,B组和C组血清S100蛋白含量及神经细胞凋亡指数均显著降低(P<0.01);C组与B组血清S100蛋白含量及神经细胞凋亡指数相比也均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论(1)运用二血管阻断加低血压法制备大鼠DHCA全脑缺血模型,是合理、经济、可行的。为探讨DHCA时进行脑保护技术提供了基本条件和实验基础。(2)给予尼莫地平能明显减轻脑损伤和脑水肿,并可抑制皮层神经细胞的凋亡,对深低温停循环后的神经细胞有良好的保护作用。(3)给予间断灌注充氧脑保护液能明显减轻脑损伤,并可抑制海马以及皮层神经细胞的凋亡,和尼莫地平联合应用后,脑保护作用优于单纯灌注脑保护液。
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