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近十年来,癌症的检出水平及治疗手段突飞猛进,从而使得癌症病人的生存时间大大延长。然而,癌症所诱发的疼痛却严重影响了肿瘤病人的生存质量。癌症疼痛(癌痛)多发生于癌症进展期和晚期,作为影响有效抗癌计划进行、影响生存质量、缩短生存期的重要因素已受到广泛重视。肿瘤骨转移并侵犯周围软组织,是疼痛的最主要原因,所以建立骨癌痛模型对于癌痛机制的研究至为重要。1999年美国的Schiwei等利用NCTC2472纤维肉瘤细胞首次建立了小鼠股骨癌痛模型,2001年Wacnik等建立了小鼠跟骨癌痛模型,2002年Medhurst等应用MRMT-1大鼠乳腺癌细胞建立了大鼠胫骨癌痛模型,随后出现了一系列的骨癌痛模型,为探索骨癌痛的发生机制、寻找有效的治疗方法提供了良好的契机。本课题选用MADB-106大鼠乳腺癌细胞来构建大鼠胫骨癌痛模型并对接种后动物的痛敏行为进行了评估,对其骨结构的破坏进行了影象学和组织病理切片分析,还对患侧脊髓切片GFAP的表达进行了免疫荧光分析,从而探讨骨癌痛的形成及其脊髓机制。方法:雌性SD大鼠16只,按照随机数字表法,分为正常对照组(C组和模型组(M组),每组8只。M组大鼠胫骨上段骨髓腔接种MADB-106大鼠乳腺癌细胞,C组骨髓腔注入10μ L0.9%氯化钠溶液,其余同M组。分别于接种前1d及接种后8、15、21d,称体重(g),记录自发性缩足反射次数及自由活动时下肢跛行程度。并于接种后8、15、21d对大鼠接种侧和对照侧后肢行X线检查。接种后22d采用HE染色法观察癌细胞对骨结构的破坏程度,采用免疫荧光检测脊髓背角GFAP蛋白的表达情况。结果:1.体重变化两组大鼠初始体重(g)分别为C组(171±14)M组(169±11)差异无统计学意义(P>0.05),术后8d,M组与C组比较,差异也无统计学意义(P>0.05)。M组大鼠术后15d起体重增长明显慢于C组,差显有统计学意义(P<0.05或0.01)2.自主缩足次数两组大鼠自主缩足次数的基础值为C组(4.4±2.4),M组(5.2±3.1)。M组大鼠术后第8d起自主缩足次数增加,但差异无统计学意义(P>0.05),第15d起自主缩足次数与C组相比差异有统计学意义(P<0.05或0.01)3.自由行走痛评分两组大鼠自由行走痛评分的基础值均为(0.0±0.0),C组大鼠接种后第2d接种侧后肢有严重跛行,接种后第8d好转,可能与手术创伤有关;M组大鼠接种后第2d也见严重跛行,第8d好转,术后第15d起各时间点自由行走疼痛评分与C组相比差异有统计学意义4.骨组织影像学改变接种后第8d,仅有少量骨小梁缺失,骨皮质完整,骨破坏轻微;第14d X线显示明显的骨破坏;第22d显示严重的骨破坏,多处骨皮质(?)缺失。5.骨组织病理学改变HE染色显示,M组肿瘤细胞充满骨髓腔,骨小梁广泛破坏,而C组骨髓腔未见肿瘤细胞和骨小梁破坏。6.脊髓背角星形胶质细胞的激活C组大鼠脊髓背角星形胶质细胞形态正常(细长的突起成辐射状分布),GFAP有低到中等程度的基础表达。而M组大鼠脊髓背角GFAP免疫反应物质(GFAP-IR)的平均密度明显增高。结论1.用MADB-106大鼠乳腺癌细胞可以成功构建大鼠胫骨骨癌痛模型;2.放射影象学和组织病理学数据显示痛行为学的改变和正常骨结构的破坏密切相关,并且破坏程度和疼痛程度呈正相关;3.痛行为学评估认为该模型有明显的痛敏.在痛敏出现时,患侧脊髓GFAP的表达明显增高,星型胶质细胞有明显的增生肥大激活表现。认为痛敏的形成可能与脊髓背角星型胶质细胞的激活有关。