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目的：
哺乳动物胚胎着床包括胚胎与子宫内膜间的识别、定位、黏附及侵袭等过程。功能性胚胎、容受性子宫内膜以及胚胎与子宫内膜同步发育是胚胎着床成功的三个关键。雌激素、孕激素、趋化因子、生长因子、脂质以及受体等多种分子参与着床的调控。
B3GNT5是β1,3-N-乙酰氨基葡萄糖转移酶家族成员之一，并且在各种组织和培养细胞中均有表达，参与细胞分化、黏附和信号传导过程。胚胎植入的过程与癌症侵袭过程相似。据文献报道，B3GNT5与胚胎的发育相关，但是B3GNT5的表达是否影响容受性子宫内膜的建立进而影响胚胎着床的机制并不清楚。本研究旨在探究B3GNT5在胚胎着床中对于容受性子宫内膜的建立所扮演的角色。
方法：
1.确定B3GNT5在人类子宫内膜中的表达
（1）收集人月经周期不同阶段子宫内膜组织样本。
（2）免疫组化实验和Real time PCR检测B3GNT5在增生期和分泌期子宫内膜中的表达和定位。
2.确定B3GNT5在高低接受态子宫内膜细胞的表达
（1）RL95-2和HEC-1A细胞分别模拟高/低接受态子宫内膜。
（2）Real time PCR和Western blot实验检测B3GNT5在模式细胞中的表达差异。
3.分析B3GNT5对子宫内膜细胞增殖、迁移、侵袭以及黏附的影响
（1）将B3GNT5siRNA，B3GNT5cDNA分别转染至RL95-2和HEC-1A细胞。
（2）CCK8实验，克隆形成实验以及EDU实验检测调控B3GNT5对细胞增殖能力的影响；流式细胞术检测调控B3GNT5对细胞周期的影响。
（3）Transwell实验检测调控B3GNT5对细胞迁移、侵袭能力的影响；细胞划痕实验检测调控B3GNT5对细胞迁移能力的影响；Western blot实验检测MMP9、MMP2表达变化。
（4）黏附实验检测JAR细胞对调控B3GNT5表达的细胞黏附能力的影响。
4.分析B3GNT5调控子宫内膜容受性建立的分子机制
（1）将B3GNT5siRNA，B3GNT5cDNA分别转染至RL95-2和HEC-1A细胞。
（2）Western blot实验检测不同表达水平的B3GNT5对PI3K/AKT通路的影响。
5.妊娠早期的小鼠子宫内膜组织中B3gnt5表达差异
（1）收集妊娠周期第一至第六天（D1~D6）的小鼠子宫内膜。
（2）免疫组化检测B3gnt5在第D1~D6小鼠子宫内膜中差异表达。
6.小鼠子宫内膜组织中雌激素、孕激素对B3gnt5表达的影响
（1）建立去卵巢小鼠模型。
（2）收集空白组、茶油组、雌激素组、孕激素组、雌孕联合组小鼠子宫内膜。
（3）免疫组化实验检测B3gnt5表达及定位。
（4）Real time PCR和Western blot实验检测B3gnt5在不同组差异表达。
结果：
1.B3GNT5在人类子宫内膜中的表达
免疫组化实验和Real time PCR实验结果显示：B3GNT5在分泌期子宫内膜的表达高于增生期。
2.B3GNT5在高低接受态子宫内膜细胞的表达
Real time PCR和Western blot实验结果显示：B3GNT5在RL95-2细胞的表达高于HEC-1A细胞。
3.B3GNT5对子宫内膜细胞增殖、迁移、侵袭以及黏附的影响
（1）CCK8，克隆形成以及EDU实验结果显示：在RL95-2细胞中下调B3GNT5表达，抑制细胞的增殖；在HEC-1A细胞中上调B3GNT5表达，促进细胞的增殖。流式细胞术结果显示：与对照组相比，下调B3GNT5表达阻碍细胞的周期进行；上调B3GNT5表达，加速细胞周期进行。
（2）Transwell实验和细胞划痕实验结果显示：下调RL95-2细胞/上调HEC-1A细胞中B3GNT5表达，抑制/促进细胞的迁移侵袭能力；Western blot实验结果显示：与对照组相比下调/上调B3GNT5表达后MMP9和MMP2的表达降低/增高。
（3）黏附实验结果显示：下调/上调细胞B3GNT5的表达，JAR细胞对RL95-2细胞的黏附能力下降/上升。
4.B3GNT5能够激活PI3K/AKT通路调控子宫内膜增殖能力
Western blot实验结果显示：与对照组相比，下调/上调B3GNT5表达后PI3K和p-AKT表达降低/升高。
5.妊娠早期的小鼠子宫内膜组织中B3gnt5表达差异
免疫组化实验结果显示：B3gnt5在D4妊娠小鼠子宫内膜中表达最高。
6.小鼠子宫内膜组织中雌激素、孕激素对B3gnt5表达的影响
（1）免疫组化实验结果显示：与对照组相比，B3gnt5在雌激素组、孕激素组以及雌孕联合组呈阳性表达。B3gnt5阳性染色位于小鼠子宫腺上皮和基质中。
（2）Real time PCR和Western blot实验结果显示：与对照组相比，B3gnt5蛋白在雌激素组、孕激素组以及雌孕联合组高表达。
结论：
1.B3GNT5在分泌期子宫内膜中表达高于增生期。
2.B3GNT5调控子宫内膜细胞增殖、迁移、侵袭以及黏附的能力。
3.B3GNT5能够激活PI3K/AKT通路来调控子宫内膜增殖能力。
4.B3gnt5在小鼠妊娠第D4表达最高。
5.雌激素、孕激素可能影响B3gnt5在小鼠子宫内膜的表达。
哺乳动物胚胎着床包括胚胎与子宫内膜间的识别、定位、黏附及侵袭等过程。功能性胚胎、容受性子宫内膜以及胚胎与子宫内膜同步发育是胚胎着床成功的三个关键。雌激素、孕激素、趋化因子、生长因子、脂质以及受体等多种分子参与着床的调控。
B3GNT5是β1,3-N-乙酰氨基葡萄糖转移酶家族成员之一，并且在各种组织和培养细胞中均有表达，参与细胞分化、黏附和信号传导过程。胚胎植入的过程与癌症侵袭过程相似。据文献报道，B3GNT5与胚胎的发育相关，但是B3GNT5的表达是否影响容受性子宫内膜的建立进而影响胚胎着床的机制并不清楚。本研究旨在探究B3GNT5在胚胎着床中对于容受性子宫内膜的建立所扮演的角色。
方法：
1.确定B3GNT5在人类子宫内膜中的表达
（1）收集人月经周期不同阶段子宫内膜组织样本。
（2）免疫组化实验和Real time PCR检测B3GNT5在增生期和分泌期子宫内膜中的表达和定位。
2.确定B3GNT5在高低接受态子宫内膜细胞的表达
（1）RL95-2和HEC-1A细胞分别模拟高/低接受态子宫内膜。
（2）Real time PCR和Western blot实验检测B3GNT5在模式细胞中的表达差异。
3.分析B3GNT5对子宫内膜细胞增殖、迁移、侵袭以及黏附的影响
（1）将B3GNT5siRNA，B3GNT5cDNA分别转染至RL95-2和HEC-1A细胞。
（2）CCK8实验，克隆形成实验以及EDU实验检测调控B3GNT5对细胞增殖能力的影响；流式细胞术检测调控B3GNT5对细胞周期的影响。
（3）Transwell实验检测调控B3GNT5对细胞迁移、侵袭能力的影响；细胞划痕实验检测调控B3GNT5对细胞迁移能力的影响；Western blot实验检测MMP9、MMP2表达变化。
（4）黏附实验检测JAR细胞对调控B3GNT5表达的细胞黏附能力的影响。
4.分析B3GNT5调控子宫内膜容受性建立的分子机制
（1）将B3GNT5siRNA，B3GNT5cDNA分别转染至RL95-2和HEC-1A细胞。
（2）Western blot实验检测不同表达水平的B3GNT5对PI3K/AKT通路的影响。
5.妊娠早期的小鼠子宫内膜组织中B3gnt5表达差异
（1）收集妊娠周期第一至第六天（D1~D6）的小鼠子宫内膜。
（2）免疫组化检测B3gnt5在第D1~D6小鼠子宫内膜中差异表达。
6.小鼠子宫内膜组织中雌激素、孕激素对B3gnt5表达的影响
（1）建立去卵巢小鼠模型。
（2）收集空白组、茶油组、雌激素组、孕激素组、雌孕联合组小鼠子宫内膜。
（3）免疫组化实验检测B3gnt5表达及定位。
（4）Real time PCR和Western blot实验检测B3gnt5在不同组差异表达。
结果：
1.B3GNT5在人类子宫内膜中的表达
免疫组化实验和Real time PCR实验结果显示：B3GNT5在分泌期子宫内膜的表达高于增生期。
2.B3GNT5在高低接受态子宫内膜细胞的表达
Real time PCR和Western blot实验结果显示：B3GNT5在RL95-2细胞的表达高于HEC-1A细胞。
3.B3GNT5对子宫内膜细胞增殖、迁移、侵袭以及黏附的影响
（1）CCK8，克隆形成以及EDU实验结果显示：在RL95-2细胞中下调B3GNT5表达，抑制细胞的增殖；在HEC-1A细胞中上调B3GNT5表达，促进细胞的增殖。流式细胞术结果显示：与对照组相比，下调B3GNT5表达阻碍细胞的周期进行；上调B3GNT5表达，加速细胞周期进行。
（2）Transwell实验和细胞划痕实验结果显示：下调RL95-2细胞/上调HEC-1A细胞中B3GNT5表达，抑制/促进细胞的迁移侵袭能力；Western blot实验结果显示：与对照组相比下调/上调B3GNT5表达后MMP9和MMP2的表达降低/增高。
（3）黏附实验结果显示：下调/上调细胞B3GNT5的表达，JAR细胞对RL95-2细胞的黏附能力下降/上升。
4.B3GNT5能够激活PI3K/AKT通路调控子宫内膜增殖能力
Western blot实验结果显示：与对照组相比，下调/上调B3GNT5表达后PI3K和p-AKT表达降低/升高。
5.妊娠早期的小鼠子宫内膜组织中B3gnt5表达差异
免疫组化实验结果显示：B3gnt5在D4妊娠小鼠子宫内膜中表达最高。
6.小鼠子宫内膜组织中雌激素、孕激素对B3gnt5表达的影响
（1）免疫组化实验结果显示：与对照组相比，B3gnt5在雌激素组、孕激素组以及雌孕联合组呈阳性表达。B3gnt5阳性染色位于小鼠子宫腺上皮和基质中。
（2）Real time PCR和Western blot实验结果显示：与对照组相比，B3gnt5蛋白在雌激素组、孕激素组以及雌孕联合组高表达。
结论：
1.B3GNT5在分泌期子宫内膜中表达高于增生期。
2.B3GNT5调控子宫内膜细胞增殖、迁移、侵袭以及黏附的能力。
3.B3GNT5能够激活PI3K/AKT通路来调控子宫内膜增殖能力。
4.B3gnt5在小鼠妊娠第D4表达最高。
5.雌激素、孕激素可能影响B3gnt5在小鼠子宫内膜的表达。