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背景：胰腺癌是一种相对罕见、恶性程度极高的消化系统肿瘤。由于解剖位置特殊,临床发病隐匿,大多数患者就诊时已属晚期,而失去手术机会,仅10～20%的病人能接受手术治疗,5年生存率仅为6.7%,而即使行根治性手术,其术后5年生存率也只能达到15～25%。因此,在基因分子水平寻找肿瘤标志物,对于胰腺癌预防、诊断、治疗及预后判断具有重要意义。既往研究表明,TNIK属MAP4K家族成员之一,是MAPK信号通路的上游因子,其活化后依次级联激活下游底物,通过JNK、Wnt/β-catenin和PI3K/Akt信号通路发挥促进细胞增殖、侵袭,抑制凋亡等作用,与多种肿瘤如结直肠癌、胃癌以及乳腺癌发病有关,但目前尚无TNIK在胰腺癌发病过程中作用的文献报道。目的：1、明确TNIK在胰腺癌及其相应癌旁组织的表达,以及TNIK表达与胰腺癌各临床病理特征和生存预后的关系。2、筛选TNIK表达水平最高的胰腺癌细胞系,以及靶向TNIK的有效SiRNA序列。3、研究TNIK对胰腺癌细胞增值、侵袭、迁移及凋亡等生物学活性的影响,为临床以TNIK为靶点的胰腺癌治疗提供理论依据。方法：1、以qPCR和Western blot法检测10对胰腺癌组织及相应癌旁组织中TNIK在mRNA和蛋白水平的表达差异,再以免疫组化法检测91例石蜡包埋胰腺癌组织中TNIK的表达水平,以探讨TNIK表达与各临床病理特征和生存预后的关系。2、以qPCR和Western blot法检测AsPC-1、BxPC-3、MiaPaca-2口Panc-1四种胰腺癌细胞系中TNIK在mRNA和蛋白水平的表达,筛选出TNIK表达水平最高的胰腺癌细胞系,再以靶向TNIK的SiRNA-1、SiRNA-2、SiRNA-3以及阴性对照(NC)、阳性对照(PC)以及空载体(Vector),在阳离子脂质体LipofectamineTM2000介导下分别转染该细胞系,筛选出干扰效率最明显的SiRNA。3、以干扰效率最高的SiRNA、NC口Vector分别转染TNIK表达水平最高的胰腺癌细胞系,再以MTT法、Transwell法、划痕愈合实验及Annexin V-FITC+PI荧光双标记法检测转染后细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡等生物学活性的改变,以明确TNIK在胰腺癌发病过程中的作用。结果：1、与癌旁组织相比,胰腺癌组织中TNIK在mRNA和蛋白水平表达显著增高(P=0.028,P<0.01)；晚期胰腺癌(Ⅱ+Ⅲ+Ⅳ期)TNIK高表达率55.4%显著高于其早期(Ⅰ期)的30.8%(P=0.040),T3+T4期胰腺癌TNIK高表达率55.7%显著高于其T1+T2期的33.3%(P=0.045); Cox单因素分析显示,与TNIK低表达相比,TNIK高表达患者术后总生存率(OS)和无瘤生存率(DFS)显著降低(OS,P=0.021; DFS, P=0.031)；然而,Cox多因素分析显示,TNIK高表达和低表达患者术后OS和DFS无显著性差异(P>0.05)。2、AsPC-1、BxPC-3、 MiaPaca-2和Panc-1四种胰腺癌细胞系中,Panc-1中TNIK表达水平最高；SiRNA-3沉默TNIK的效率最高,可达78.7±4.5%。3、SiRNA-3沉默胰腺癌细胞Panc-1后,其增值、侵袭、迁移活性显著降低,细胞凋亡加速。结论：1、TNIK表达水平在胰腺癌组织中显著增高,并与胰腺癌TNM病理分期以及其中T分期有关；TNIK高表达是影响胰腺癌OS和DFS的危险因素；2、TNIK在胰腺癌发病过程中起促进细胞增殖、侵袭、迁移,以及抑制凋亡等生物学的作用。