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小RNA是一类小的非编码的长度在23个核苷酸的RNA,其序列高度保守,在植物和动物中通过结合靶基因的3’非编码区,从而在翻译水平上调节基因的表达。大多数研究表明,小RNA在细胞的增殖、分化、凋亡中有重要的作用。已有研究表明,mi R-142-3p在乳腺中有表达,但在乳腺上皮细胞的调控靶点有哪些,尚不完全清楚。本研究以乳腺上皮细胞MCF-10A为实验模型,探讨mi R-142-3p在乳腺上皮细胞的调控靶点及对乳腺上皮细胞的作用。应用RIP免疫共沉淀技术,筛选出mi R-142-3p的靶基因,同时,应用EDU荧光标记、流式细胞术、transwell侵袭实验、免疫印迹等技术研究其如何调节乳腺上皮细胞的增殖、生长和分化过程及其对相关信号通路的作用。结果表明:1)RNA免疫共沉淀结果显示,mi R-142-3p调控的靶点包括纤维原细胞生长因子5(FGF5)、结肠癌转移相关基因1(MACC1)、细胞周期蛋白(CD1)等参与细胞的增殖及分化。验证了靶基因预测软件中mi R-142-3p的靶基因催乳素受体(PRLR)也是mi R-142-3p的调控靶点之一。mi R-142-3p调控PRLR的mRNA的3′UTR区域,抑制PRLR的表达。2)在乳腺上皮细胞MCF-10A中,过表达及基因沉默mi R-142-3p后,通过实时荧光定量PCR检测PRLR基因的表达量,实验结果表明,mi R-142-3p负向调控PRLR m RNA的表达量。通过免疫印迹实验检测转染前后蛋白表达的变化结果表明,转染mi R-142-3p mimics后,PRLR蛋白及相关通路蛋白显著降低。转染mi R-142-3p inhibitor后,PRLR蛋白及相关通路蛋白有升高的趋势。mi R-142-3p通过对PRLR的负向调控,进而影响乳腺上皮细胞的功能。3)在乳腺上皮细胞MCF-10A中过表达mi R-142-3p后,利用Edu技术检测DNA增殖情况、流式细胞术检测细胞凋亡,transwell小室检测细胞侵袭能力,MTT实验检测细胞粘附能力,研究表明,过表达mi R-142-3p对乳腺上皮细胞MCF-10A的增殖、侵袭、粘附能力有抑制的作用,同时对细胞的凋亡有促进的作用。沉默mi R-142-3p后结果相反。4)转染mi R-142-3p mimics后,用乳糖试剂盒及乳脂检测试剂盒检测乳腺上皮细胞MCF-10A中乳糖及乳脂的含量,结果显示,乳腺上皮细胞MCF-10A培养液分泌物中乳脂的表达量减少,而乳糖的变化不明显;而抑制mi R-142-3p后,细胞分泌物中乳脂的表达量升高,乳糖的变细胞MCF-10A化仍不显著。证明mi R-142-3p对于乳腺上皮细胞MCF-10A分泌乳脂的能力有调节的作用,但是对于分泌乳糖的能力作用不大。