【摘 要】
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本文从合成培养基和复合培养基两种培养基中研究对大肠杆菌BL21发酵生产嘌呤核苷磷酸化酶具有关键性影响的因素。在合成培养基中,通过逐个添加各种维生素、氨基酸,采用单因素方
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本文从合成培养基和复合培养基两种培养基中研究对大肠杆菌BL21发酵生产嘌呤核苷磷酸化酶具有关键性影响的因素。在合成培养基中,通过逐个添加各种维生素、氨基酸,采用单因素方差分析来研究各种因素对大肠杆菌生长、单位菌体酶活、发酵液酶活的影响。而在复合培养基中通过复配得到各种培养基,计算培养基中氨基酸和无机盐的含量,采用聚类分析和粗糙集分析来研究氨基酸和无机盐对发酵的影响。在合成培养基中,我们找到了丝氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸、色氨酸对细胞生长具有明显的促进作用,同时蛋氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸、色氨酸能够促进单位菌体酶活的增加,最终谷氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸、色氨酸能够促进发酵液总酶活的增加。而维生素研究中,Vpp,VB7,VB9,VB12,VB6能够促进发酵液总酶活的增加。在复合培养基中,则是甘氨酸和天冬氨酸能够明显促进大肠杆菌的生长,丙氨酸和甘氨酸能够促进单位菌体酶活和发酵液总酶活的增加。通过摇瓶中的验证实验,只有甘氨酸和丙氨酸能够明显促进复合培养基中发酵液的总酶活。故在最后的实验研究中,我们采用发酵罐重点验证了丙氨酸和甘氨酸的作用。添加丙氨酸和甘氨酸比空白组目的蛋白含量从24%上升到了36%,同时发酵液酶活从220U/ml提高到360U/ml,比进口原料的344U/ml还要高。
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